The development of TDM for hypnotic drugs using a micro blood sampling

使用微量血液采样开发催眠药物的 TDM

• 批准号: 22K06722
• 负责人: 藤吉 正哉
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Tottori University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K06722/
• 关键词: TDM; LC/MS/MS; 個別適正化; 睡眠薬; 個別化医療; LC-MS/MS

メラトニン（MEL）は小児の入眠改善薬として用いられる概日リズム調節ホルモンであり、入眠改善薬の中では唯一の内因性化合物である。内因性化合物の精密定量には、測定対象物を除いたマトリックス（血漿、尿）の準備が必要であるが、準備が困難な場合が多い。また、MELの正常時血中濃度は低く、高感度定量が求められる。そこで、検出器として質量分析装置（MS）を用い、MELの安定同位体標識化合物（MEL-d4）を代替標準として利用した定量系構築を試みた。MEL-d4のMSスペクトルを確認したところ、重水素の転移もしくはプロトン脱離が示唆され、イオン化最適条件ではMELとピーク強度に違いが認められた。従って、MEL検出のCEを調整し、MELおよびMEL-d4のピーク強度を一致させ、検量線を作成することとした。また、別の安定同位標識化合物（MEL-d7）を内部標準として利用することで、マトリックス効果の影響を解消した。サンプルの濃縮操作なしの場合、定量下限は50 pg/mLであった。MELの正常時血中濃度は20 pg/mL以下であり、感度向上が必要であると判断した。オンライン固相抽出による試料濃縮を前処理に追加することで、定量下限は2 pg/mLまで改善した。感度の向上した方法で作成した検量線は、2～500 pg/mLの範囲で直線性を示した。構築した定量系を用いて、MELを服用していない入院患者33名のMEL血中濃度を測定した結果、血中濃度の中央値は7.08 pg/mL (IQR; 3.18-12.67 pg/mL)であり、実臨床でも血中濃度測定は可能であると判断した。順次、処方頻度の高い睡眠改善薬（レンボレキサント、スボレキサント、ラメルテオン、エスゾピクロン）の定量系構築を進めていく。

MEL is the only intrinsic compound in the sleep improvement agent. Preparation for precise quantification of endogenous compounds is necessary and difficult in many cases. When MEL is normal, the blood concentration is low and the sensitivity is high. A mass spectrometer (MS) was used to construct a quantitative system using MEL-d4 instead of a standard. MEL-d4-MS is identified as the most suitable condition for MEL-d4-MS to be identified. MEL and MEL-d4 are identical. The effect of MEL-d7 on the stability of the compound is eliminated by internal standards. The limit of quantification is 50 pg/mL. MEL concentration in normal blood is below 20 pg/mL, sensitivity is upward, and judgment is necessary. Sample concentration before solid phase extraction was increased to 2 pg/mL. The sensitivity method is based on linearity in the range of 2~500 pg/mL. A quantitative system was constructed to determine the serum concentration of MEL in 33 patients admitted to the hospital after MEL administration. The results showed that the median serum concentration of MEL was 7.08 pg/mL (IQR; 3.18-12.67 pg/mL). The quantitative system of sleep improvement parameters (