Novel roles of DNA methylation in stress response mediated by nuclear receptor AhR

DNA甲基化在核受体AhR介导的应激反应中的新作用

• 批准号: 22K06728
• 负责人: 幅野 渉
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Iwate Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K06728/
• 关键词: 核内受容体; DNAメチル化; ストレス応答

細胞が環境変化のストレスにさらされたとき、核内受容体aryl hydrocarbon receptor（AhR）はストレスをリガンドとして感知するセンサーと、必要な応答を誘導する転写因子の2役を担う。前研究課題では、AhRが転写因子として非メチル化状態の標的遺伝子（CYP1B1）に選択的に結合することを証明してきた。そこで本研究課題では、細胞がDNAメチル化修飾を利用してAhRを介したストレス応答を変動させる可能性を探索する。研究期間の開始となる令和4年度は、5-aza-2’-deoxycytidine（DAC）の処理でDNA脱メチル化を誘導したヒト肝臓がんHepG2およびHuH7細胞において、AhRのリガンド（β-naphthoflavone、βNF）の曝露によりCYP2あるいはCYP3遺伝子の発現誘導が起こるのかを検証した。これらのCYP遺伝子はCYP1遺伝子とは異なり、βNFの曝露によりAhRを介した発現の誘導は起こらないことが知られている。その結果、AhRの標的XRE配列を完全に非メチル化の状態とした場合でも、発現の誘導が検出されることはなかった。これより、AhRを介した遺伝子発現誘導はXRE配列を有するだけでは起こらず、よりダイナミックなクロマチンレベルの制御機構が関わる可能性が示唆された。AhRは生理的な条件下において、消化管や肺などの粘膜上皮における生体内の恒常性維持に関わる。これらの組織は外部環境と直接つながり、生体外のストレスを最前線で感知する場である。そこでヒト大腸がん培養細胞を消化管の上皮細胞をモデルとみなし、AhRを介したストレス応答変動に関わるDNAメチル化の役割を探索することにした。令和4年度はその準備として、5種の大腸がん細胞（LoVo、LS180、DLD-1、Caco-2、HCT116）に同様のDACおよびβNF処理を施し、RNAを回収した。

The cellular environment is sensitive to environmental pollution, the nuclear acceptor aryl hydrocarbon receptor (AhR) is sensitive to environmental pollution, the nuclear acceptor is sensitive to environmental pollution, and the necessary response should be directed to the writing factor 2. The previous research topic, AhR, writes the factors that do not change the status of the child (CYP1B1) selected by the combination of the data sets in order to indicate the status of the target. In the course of this study, we will explore the possibility of making use of the introduction of the AhR to answer the possibility of the exercise in this research project and the cell DNA training program. During the period of the study, 5-aza-2'-deoxycytidine (DAC) began to order and in the fourth year of the study, 5-aza-2'-deoxycytidine (DAC) was responsible for the treatment of HepG2, HepG2, HuH7, and AhR. During the period of the study, it was revealed that the health care system was responsible for the health of the CYP3. You need to know that you are not in a position to know if you want to know if you want to know if you are going to have a problem with CYP, AhR, and β-NF exposure. The results show that the XRE of the AhR database is assigned to the complete system, the status of the system is closed, and the message is displayed to lead to the failure of the system. You can see that the command XRE is equipped with the following information, such as the system, the AhR, the system, the controller, the driver, the driver, the Under the physiological conditions of AhR, the digestive tract, lung and mucosal epithelium were kept constant in vivo. The organization is responsible for the direct monitoring of the external environment, and the in vitro environment is at the forefront of awareness. In general, the digestive tract was cultured, the epithelial cells of the digestive tract were cultured, the AhR was introduced, and the movement was performed. The DNA was cut in service and explored. Ling and in the year 4, you will be prepared for the first time (LoVo, LS180, DLD-1, Caco-2, HCT116) in the same way as DAC, β-NF, and RNA.