Study on the relationship between depressive vulnerability and pain responsiveness due to opioid peptides in the striatum

点击翻译按钮获取中文摘要

先行研究で得られた結果をもとにリアルタイムPCRでも再度発現変動を確認したのち、Penkのguide RNAを作成し、CRISPR/Cas9システムを用いたゲノム編集を行った。CRISPR/Cas9システムの組み込まれたアデノ随伴ウイルスベクター（AAV）の相同組み換えを行い、AAVベクターを作成した。作成したAAVベクターを一過性に細胞へ過剰発現させ、その効果を検討したところPCRやウエスタンブロッティングにおいてPenk遺伝子の発現減少が確認された。そこでこのAAVベクターを用いてAAVの作成を行った。作成したAAVを線条体に注入し、社会的敗北ストレスの暴露（repeated social defeat stress（RSDS））を行った。RSDS終了24時間後に、social interaction testにより社会性行動を測定した。さらに、閾値以下の社会敗北ストレス(micro social defeat stress(MSDS))を曝露し、社会性行動を測定した。MSDSは遺伝子改変マウスにICRマウスとの5分間の身体的接触を3回行い、それぞれの接触の後15分間隔離した。3回目の接触後は別のケージで飼育し翌日社会性行動を測定した。MSDSは通常のマウスではうつ症状を示さない軽度のストレスであるが遺伝的脆弱性があるとストレス応答を示すモデルである。その結果AAVを感染させたマウスでは、RSDSによってうつ症状を示すマウスの割合が増加した。また、MSDSにおいてコントロール群ではうつ症状を示すマウスが確認できなかったのに対し、AAVを感染させたマウスではうつ症状を示すマウスが確認された。これらのことよりPenk遺伝子がマウスうつ脆弱性に関与している可能性が示唆された。