权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

Study on the relationship between depressive vulnerability and pain responsiveness due to opioid peptides in the striatum

纹状体阿片肽所致抑郁脆弱性与疼痛反应性关系的研究

基本信息

批准号：
22K06735
负责人：
宇野恭介
金额：
$ 2.5万
依托单位：
Setsunan University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K06735/
关键词：
うつ線条体痛み AAV

项目摘要

先行研究で得られた結果をもとにリアルタイムPCRでも再度発現変動を確認したのち、Penkのguide RNAを作成し、CRISPR/Cas9システムを用いたゲノム編集を行った。CRISPR/Cas9システムの組み込まれたアデノ随伴ウイルスベクター（AAV）の相同組み換えを行い、AAVベクターを作成した。作成したAAVベクターを一過性に細胞へ過剰発現させ、その効果を検討したところPCRやウエスタンブロッティングにおいてPenk遺伝子の発現減少が確認された。そこでこのAAVベクターを用いてAAVの作成を行った。作成したAAVを線条体に注入し、社会的敗北ストレスの暴露（repeated social defeat stress（RSDS））を行った。RSDS終了24時間後に、social interaction testにより社会性行動を測定した。さらに、閾値以下の社会敗北ストレス(micro social defeat stress(MSDS))を曝露し、社会性行動を測定した。MSDSは遺伝子改変マウスにICRマウスとの5分間の身体的接触を3回行い、それぞれの接触の後15分間隔離した。3回目の接触後は別のケージで飼育し翌日社会性行動を測定した。MSDSは通常のマウスではうつ症状を示さない軽度のストレスであるが遺伝的脆弱性があるとストレス応答を示すモデルである。その結果AAVを感染させたマウスでは、RSDSによってうつ症状を示すマウスの割合が増加した。また、MSDSにおいてコントロール群ではうつ症状を示すマウスが確認できなかったのに対し、AAVを感染させたマウスではうつ症状を示すマウスが確認された。これらのことよりPenk遺伝子がマウスうつ脆弱性に関与している可能性が示唆された。

The results of the preliminary study were as follows: 1. PCR detection was performed to confirm the presence of CRISPR/Cas9 in the genome. CRISPR/Cas9 is the same set of events as AAV. The results of this study confirm that AAV gene expression is reduced. This is the first time I've ever seen an AAV. Create a line of injection, repeated social defeat stress (RSDS) After 24 hours of RSDS, social interaction test was conducted. Social Defeat Stress(MSDS) below the Threshold MSDS is a 5-minute physical contact, 3-minute isolation, and 15-minute isolation. 3. The social behavior of the child after contact MSDS is usually used to indicate the vulnerability of the disease. AAV infection and RSDS symptoms increase The MSDS is a list of symptoms that can be identified by AAV infection. The vulnerability of Penk's heritage is related to the possibility of.