Enzymological studies on N-acyl-PS a novel triacyl-type phospholipid

新型三酰基型磷脂N-酰基-PS的酶学研究

基本信息

  • 批准号:
    22K06885
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.66万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
  • 财政年份:
    2022
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2022-04-01 至 2025-03-31
  • 项目状态:
    未结题

项目摘要

3本の脂肪酸鎖を有するグリセロリン脂質である「トリアシル型リン脂質」は、ヒトを含む種々の動物組織から単離されている。代表的な分子であるN-アシル-PEは、ホスファチジルエタノールアミン(PE)のエタノールアミン部分のアミノ基に3本目の脂肪酸鎖が結合しており、脂質メディエーターであるN-アシルエタノールアミンの前駆体である。一方、PEがホスファチジルセリン(PS)に置き換わったN-アシル-PSは、脳などから単離されているが、生合成・分解経路はほとんど不明である。N-アシル-PSからの生成が想定されるN-アシルセリンは血管拡張・抗炎症・神経保護・骨形成などの生物活性を示す。本研究では、N-アシル-PSの代謝経路を特定し、関与する酵素の実体を解明することを目的とした。1年目の令和4年度は、N-アシル-PSの生合成経路の手掛かりを得るための研究を実施した。N-アシル-PE合成活性(N-アシル転移活性)を有する既知の酵素のいずれかがN-アシル-PS合成能を併せ持つ可能性を考え、N-アシル転移活性を有する細胞質型ホスホリパーゼA2-ε(cPLA2ε)とPLAATファミリータンパク質(PLAAT-2)のcDNAを調製し、それぞれを哺乳類細胞で過剰発現させた。これらの細胞を[14C]エタノールアミンまたは[14C]セリンの存在下で培養した後に脂質を抽出し、薄層クロマトグラフィーで分離して放射能の分布を測定した。その結果、いずれの細胞においても[14C]エタノールアミンの標識により[14C]N-アシル-PEの生成を認めたのに対し、[14C]セリンによる[14C]N-アシル-PSに相当するバンドの生成は認められなかった。また、cPLA2εとPLAAT-2を発現させた細胞のホモジネートを[14C]ホスファチジルコリン と非標識PSと反応させたが、 [14C]N-アシル-PSは検出されなかった。
3. The fatty acid chain contains lipids, lipids, and animal tissues. The fatty acid chain of the present invention is bound to the N-isomer and the precursor of the lipid chain. A party, PE, PE, PS, PS The production of N-acetylcholine is thought to be responsible for the biological activity of N-acetylcholine in vasodilation, anti-inflammation, neuroprotection and bone formation. This study aims to clarify the metabolic pathway of N-acetylcholine and its related enzymes. 1 year order and 4 years, N-A-R-P synthesis process is carried out. N-Aryl-PE synthesis activity (N-Aryl-shift activity) is a well-known enzyme, and the possibility of N-Aryl-PS synthesis activity and N-Aryl-shift activity is examined. Cytoplasmic type of PLAAT-2 cDNA is modulated and developed in mammalian cells. In the presence of [14C], the cells were isolated and the distribution of radioactivity was measured. The results show that the [14C] N-state-PE production process is related to the [14C] N-state-PS production process, and the [14C] N-state-PE production process is related to the [14C] N-state-PS production process. CPLA2ε and PLAAT-2 were found in the cells of the [14C] system, and the [14C] system was found in the cells of the system.

项目成果

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专著数量(0)
科研奖励数量(0)
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专利数量(0)
脂質メディエーターN-アシルエタノールアミンの分解における酸性セラミダーゼの関与
酸性神经酰胺酶参与脂质介质 N-酰基乙醇胺的降解
  • DOI:
  • 发表时间:
    2022
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    上田夏生;坪井一人;田井達也;松田純子;田中 保
  • 通讯作者:
    田中 保
グリセロホスホジエステラーゼ7は小胞体内腔において環状ホスファチジン酸を産生する
甘油磷酸二酯酶 7 在内质网腔中产生环状磷脂酸
  • DOI:
  • 发表时间:
    2022
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    S.M. Khaledur Rahman;Toru Uyama;Zahir Hussain;Mohammad Mamun Sikder;Hiroyuki Saiga;Kenichi Ota;Katsuaki Hoshino;Masaki Ueno;Yoshimi Miki;Makoto Murakami;Natsuo Ueda;北風 圭介,坪井 一人,Hanif Ali,木本 来希,竹之内 康広,石丸浩靖,山下 純,上田 夏生,田中 保,岡本 安雄
  • 通讯作者:
    北風 圭介,坪井 一人,Hanif Ali,木本 来希,竹之内 康広,石丸浩靖,山下 純,上田 夏生,田中 保,岡本 安雄
Involvement of glycerophosphodiesterase 7 in the intracellular production of cyclic phosphatidic acid
甘油磷酸二酯酶 7 参与细胞内环磷脂酸的产生
  • DOI:
  • 发表时间:
    2022
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Rahman S.M. Khaledur;Uyama Toru;Hussain Zahir;Sikder Mohammad Mamun;Saiga Hiroyuki;Ohta Kenichi;Hoshino Katsuaki;Ueno Masaki;Miki Yoshimi;Murakami Makoto;Ueda Natsuo;前田 萌羽,前本 佑樹,青木 元秀,宇山 徹,梅村 知也,上田 夏生,吉田 稔,伊藤 昭博;北風圭介,Ali Hanif,木本 来希,竹之内 康広,石丸 浩靖,山下 純,上田 夏生,田中 保,岡本 安雄,坪井 一人
  • 通讯作者:
    北風圭介,Ali Hanif,木本 来希,竹之内 康広,石丸 浩靖,山下 純,上田 夏生,田中 保,岡本 安雄,坪井 一人
香川大学医学部 生体分子医学講座 生化学 ホームページ
香川大学医学院生物分子医学系生物化学主页
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Assay of NAT Activity
NAT 活性测定
  • DOI:
    10.1007/978-1-0716-2728-0_17
  • 发表时间:
    2023
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Uyama Toru;Ueda Natsuo
  • 通讯作者:
    Ueda Natsuo
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  • 通讯作者:
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  • 通讯作者:
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    $ 2.66万
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知道了