GGCTとxCTのダブル阻害によりフェロトーシスを増強する全く新しいがん治療戦略

一种全新的癌症治疗策略，通过GGCT和xCT双重抑制来增强铁死亡

基本信息

批准号：
22K06756
负责人：
飯居宏美
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Kyoto Pharmaceutical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K06756/
关键词：
フェロトーシス GGCT xCT阻害剤フェロト―シス xCT 抗腫瘍効果がんの代謝

项目摘要

初年度は、GGCT阻害剤pro-GAとxCT阻害剤の併用によるがん細胞に対するフェロトーシス細胞死誘導増強の実証を目的に研究を進めた。まず、GGCT遺伝子増幅とxCTの高発現が報告されている膠芽腫に着目し、４種類のヒト膠芽腫細胞株A172、U87MG、U251、T98細胞に、独自のGGCT阻害剤pro-GAを作用させ、増殖抑制効果を検討した。また、それぞれの細胞株におけるGGCTの発現量を比較したところ、いずれの細胞においてもヒトの正常アストロサイト細胞に比しGGCTの高い発現とpro-GAによる増殖抑制効果が見られた。また、マウス膠芽腫モデルから樹立した３種類の膠芽腫幹細胞株におけるGGCT発現量とpro-GA処理による増殖抑制効果も検討した。いずれの細胞でも同様に、GGCTの高発現とpro-GA処理による増殖抑制効果が見られた。さらに、その中でもGGCTの発現とpro-GAによる細胞増殖抑制効果が高いマウス膠芽腫幹細胞とU87MG細胞にpro-GAとxCT阻害剤であるerastinを処理し増殖抑制効果を検討したところ、統計学的有意な相乗効果を確認した。また、それらの増殖抑制効果はフェロトーシス阻害剤であるFerrostatinにより有意に回復した。そこで、さらに、pro-GAによりフェロトーシスが誘起されるか、またerastinとの併用でフェロトーシスが増強されるかについて、酸化型多価不飽和脂肪酸の生成について、フローサイトメトリー法を用いて解析したところ、proGAとerastin処理により有意に酸化型多価不飽和脂肪酸が増加し、２剤の併用によりさらなる増加が確認された。以上の実験結果を通して、pro-GAによる細胞死とerastinによる細胞死機構には、フェロトーシス細胞死の誘導が関与しているという、本研究課題における仮説について検証し、意義深い結果を得た。

在第一年，进行了研究，以证明使用GGCT抑制剂Pro-GA和XCT抑制剂来证明癌细胞中铁凋亡细胞死亡的诱导。首先，我们专注于胶质母细胞瘤，据报道，胶质母细胞瘤具有高表达GGCT基因扩增和XCT的表达，并使用独特的GGCT抑制剂Pro-GA检查了四种类型的人胶质母细胞瘤细胞系A172，U87MG，U251和T98细胞的增殖抑制作用。此外，与正常的人类星形胶质细胞相比，在比较每种细胞系中GGCT的表达水平时，Pro-GA的表达均高于Pro-GA的增殖抑制作用。我们还研究了GGCT表达的量以及前GA处理对从小鼠胶质母细胞瘤模型中建立的三种类型的胶质母细胞瘤干细胞系的影响。同样，在两个细胞中都观察到了GGCT的高表达和前GA治疗的增殖抑制作用。此外，在其中，用pro-GA和XCT抑制剂Erastin治疗了对GGCT表达和细胞增殖抑制具有很高影响的小鼠胶质母细胞瘤干细胞和U87MG细胞，并确认了统计学上重要的协同作用。此外，亚铁蛋白（一种抑制剂亚铁蛋白）显着恢复了它们的生长抑制作用。此外，当使用流式细胞仪分析氧化多不饱和脂肪酸的产生，以确定pro-GA诱导的螺旋病以及与Erastin结合结合使用氧化的氧化脂肪酸时，使用了两位氧化的多不饱和脂肪酸的产生，并通过两位氧化的脂肪酸来显着增加，并通过两位蛋白质来增加，并且使用了两位氧化脂肪酸，并且使用了两位氧化剂。通过上述实验结果，我们研究了该研究主题中的假设，即诱导铁毒细胞死亡与亲GA诱导的细胞死亡机制有关，并获得了有意义的结果。