進行期直腸癌のS100A4依存性癌幹細胞ニッチ形成を標的とした新規治療戦略

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本年は、直腸癌組織でのNMⅡA/p53系抑制によるS100A4陽性癌幹細胞の可視化するため、A①NCRT未施行の100例前後の外科的切除された直腸癌の臨床検体を免疫組織学的に検索する。A②in situ PLAで、簇出部でのS100A4、NMⅡA、p53の会合の検索。A③RT-PCR及びWestern blot assay：①の免疫染色結果を、新鮮材料を用いてmRNAおよび蛋白質発現レベルで検証。A④S100A4発現と直腸癌の臨床病理学的因子との関連性を検証。A⑤サイトカイン・キモカインアッセイ：臨床検体から間質細胞を分離・培養した培養液中に分泌されている液性因子を、サイトカイン・キモカインアレイキットで検索。同定した液性因子を大腸癌培養細胞やB-①②で作製したS100A4過剰発現・抑制系の培養液に加えて、S100A4依存性癌幹細胞化への影響を検証。A⑥上記液性因子の発現を病理組織標本上で検証し、簇出部との関連性からS100A4依存性癌幹細胞ニッチを可視化。について進めている。A①では、NCRT未施行の100例前後の外科的切除された直腸癌の臨床検体の臨床病理学的因子のデータの調査、症例の病理組織標本を確認し、使用組織ブロックの選別と収集、免疫組織化学染色施行用の未染標本作製を進めている。また、A④S100A4発現と直腸癌の臨床病理学的因子との関連性を検証するため、直腸癌の臨床病理学的因子のデータの調査、症例の病理組織標本を確認し、使用組織ブロックの選別と収集を進めている。直腸癌培養細胞でのS100A4/NMⅡA/p53系による癌幹細胞化誘導の分子機構の解明のために用いる直腸癌培養細胞の培養、保存を行っている。