サルモネラT3SS-2によるマクロファージ細胞死誘導機構の解明

阐明沙门氏菌 T3SS-2 诱导巨噬细胞死亡的机制

• 批准号: 22K07073
• 负责人: 羽田 健
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Kitasato University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K07073/
• 关键词: サルモネラ; T3SS-2; 細胞死; エフェクター

サルモネラは独立した2つのIII型分泌機構（Type III Secretion System; T3SS-1および -2）を保有し、これらの分泌機構から宿主細胞に直接分泌・注入されるタンパク質(エフェクター)が病原性発現において中心的な役割を担う。これまでにCaspase-11遺伝子欠損RAW（Casp11-KO）細胞ではサルモネラのT3SS-2により誘導されるマクロファージの細胞死がRAW細胞の50%程度に低下することを明らかにした。このことは、サルモネラに感染したマクロファージではT3SS-2によってCaspase-11依存的な細胞死（非典型パイロトーシス）の他、未同定のCaspase-11非依存的細胞死が誘導されることを示す。本研究ではCaspase-11非依存的細胞死に注目し、アポトーシス、ネクロトーシス、またはオートファジー細胞死のような既知の細胞死であると仮説を立て、Casp11-KO細胞にサルモネラを感染した後、各種細胞死の阻害剤を培地に添加し、細胞死の指標として培養上清中の乳酸脱水素酵素(LDH)を測定した。その結果、カテプシンB阻害剤であるCA074-Meを培地に添加することにより細胞死が抑制された。そこでRAW細胞のカテプシンB欠損（CtsB-KO）細胞を作製し、同様にLDHを測定したところ、サルモネラを感染したRAW細胞と比較して低下した。このことからサルモネラによるCaspase-11非依存的細胞死にカテプシンBが関与することが明らかとなった。しかし、CtsB-KO細胞にCA074-Meを添加してもLDHが低下することから、T3SS-2によって誘導されるCaspase-11非依存的細胞死にはカテプシンB以外の宿主因子が関与することが示唆された。

沙门氏菌具有两种独立的III型分泌机制（T3SS -1和-2），以及分泌的蛋白质（效应子），并直接从这些分泌机制中直接注射到宿主细胞中，在致病表达中起着核心作用。到目前为止，已经揭示了由沙门氏菌T3SS-2在缺乏caspase-11基因的原始细胞中诱导的巨噬细胞死亡降低到约50％的生细胞。这表明，在感染了沙门氏菌的巨噬细胞中，T3SS-2诱导caspase-11依赖性细胞死亡（非典型的凋亡）以及未识别的caspase-11独立细胞死亡。在这项研究中，我们专注于caspase-11非依赖性细胞死亡，并假设它是已知的细胞死亡，例如凋亡，坏死或自噬细胞死亡。用沙门氏菌感染CASP11-KO细胞后，将各种细胞死亡抑制剂添加到培养基中，并测量培养上清液中乳酸脱氢酶（LDH）作为细胞死亡的指标。结果，通过在培养基中添加CA074-ME（一种组织蛋白酶B抑制剂）来抑制细胞死亡。因此，在RAW细胞中产生组织蛋白酶B缺陷型（CTSB-KO）细胞，并以相同的方式测量LDH，并且与感染沙门氏菌感染的RAW细胞相比，结果降低。这表明组织蛋白酶B参与沙门氏菌与caspase-11独立的细胞死亡。然而，在CTSB-KO细胞中添加Ca074-Me会降低LDH，这表明组织蛋白酶B以外的其他宿主因子与T3SS-2诱导的caspase-11非依赖性细胞死亡有关。

项目成果

O-acetylesterase activity of Bifidobacterium bifidum sialidase facilities the liberation of sialic acid and encourages the proliferation of sialic acid scavenging Bifidobacterium breve.

双歧杆菌唾液酸酶的 O-乙酰酯酶活性有利于唾液酸的释放，并促进唾液酸清除短双歧杆菌的增殖。

• DOI: 10.1111/1758-2229.13083
• 发表时间: 2022
• 期刊: Environmental microbiology reports
• 影响因子: 3.3
• 作者: Yokoi T;Nishiyama K;Kushida Y;Uribayashi K;Kunihara T;Fujimoto R;Yamamoto Y;Ito M;Miki T;Haneda T;Mukai T;Okada N.
• 通讯作者: Okada N.

サルモネラT3SS-2によるマクロファージ細胞死誘導機構

沙门氏菌T3SS-2诱导巨噬细胞死亡的机制

• 发表时间: 2023
• 作者: Otake Tsuyoshi;Fujimoto Mayuka;Hoshino Yusuke;Ishihara Tomomi;Haneda Takeshi;Okada Nobuhiko;Miki Tsuyoshi;羽田健
• 通讯作者: 羽田健

Fatty Acid Homeostasis Tunes Flagellar Motility by Activating Phase 2 Flagellin Expression, Contributing to Salmonella Gut Colonization

• DOI: 10.1128/iai.00184-22
• 发表时间: 2022-06
• 期刊: Infection and Immunity
• 影响因子: 3.1
• 作者: Y. Hoshino;Taro Sakamoto;Naoki Sudo;Masahiro Ito;Takeshi Haneda;N. Okada;T. Miki

Vi polysaccharide and conjugated vaccines afford similar early, IgM or IgG-independent control of infection but boosting with conjugated Vi vaccines sustains the efficacy of immune responses.

• DOI: 10.3389/fimmu.2023.1139329
• 发表时间: 2023
• 期刊: Frontiers in immunology
• 影响因子: 7.3