大腸発癌におけるマトリプターゼ発現の意義に関する研究

基质酶表达在结直肠癌发生中的意义研究

基本信息

批准号：
22K07154
负责人：
川口真紀子
金额：
$ 2.75万
依托单位：
University of Miyazaki
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K07154/
关键词：
マトリプターゼ大腸癌潰瘍性大腸炎

项目摘要

マトリプターゼはST14遺伝子によってコードされるII型膜貫通セリンプロテアーゼである。ST14ノックアウト（KO）マウスは腸上皮のバリア機能が破綻し、炎症関連大腸癌を誘発することが報告されている。そのメカニズムを解析するために、腸管特異的にCre酵素を発現するVillin-CreマウスとSt14 floxed マウスを交配し腸管特異的マトリプターゼKOマウスを作製した。誕生したKOマウスを用いて時系列で腸管発癌の発生と癌の進展度を肉眼的、組織学的に観察したところ、生後約4週で杯細胞の減少や炎症がみられ、生後約5週で腸上皮に異型細胞が出現していた。生後約8週では、潰瘍性大腸炎にみられるような陰窩膿瘍や細胞異型もみられた。生後10週頃には半数以上のマウスに浸潤性の大腸がんがみられ、14週までにすべてのマウスが死亡した。次にマトリプターゼ欠損に伴う大腸上皮細胞自身の遺伝子発現変化が発癌を引き起こす可能性について検討するために、すでに当研究室で維持している全身でタモキシフェン誘導性にCreを発現するROSA-Cre-ERT2マウスとSt14 floxedマウスを交配し、タモキシフェン誘導性のマトリプターゼコンディショナルKOマウスを作製し大腸からのオルガノイド培養を試みた。樹立したオルガノイドにタモキシフェンを添加し、マトリプターゼを欠失させ、RNAを抽出しPCRアレイによりマトリプターゼノックアウトにより発現が変動する遺伝子の探索を行った。現在、遺伝子発現の解析をすすめ、大腸発癌との関連を検討しているところである。

Matriptase是由ST14基因编码的II型跨膜丝氨酸蛋白酶。据报道，ST14敲除（KO）小鼠会破坏肠上皮的屏障功能，并诱导与炎症相关的结肠癌。为了分析这种机制，将表达特异性肠道和st14 floxed小鼠的villin-cre小鼠配对以产生肠道特异性雌马蛋白原酶KO小鼠。使用天生的KO小鼠，我们从宏观和组织学上观察到肠道癌的发生和癌症的发展程度，随着时间的流逝，大约5周后肠上皮出现了非典型细胞。在大约8周龄时，也存在着隐窝脓肿和细胞非典型特征，例如在溃疡性结肠炎中看到的特征。超过一半的小鼠在10岁左右患有侵入性结肠癌，到所有小鼠死亡时。接下来，为了调查大型肠上皮细胞本身基因表达的变化可能导致肌酸酶缺乏症可能引起致癌作用，我们已经在体内表达CRE的Rosa-Cre-ert2小鼠，我们已经在实验室中维持了诱人的体内，这已经在实验室中维持，并诱导了他莫昔芬诱导的Matriptase Ko Mitice intripate in Cruntional in Cruntrest and Intrubted Ortansot和未尝试的物质，并产生了较大的养分。他莫昔芬被添加到已建立的类器官，删除了matriptase，提取RNA，并通过可变的基质 - 米斯酶敲除搜索其表达的基因。目前，我们正在促进基因表达的分析，并正在研究与结肠癌的关联。