脳腫瘍幹細胞の表現型可塑性及びフェノタイプ・スイッチの実態解明と克服方法の確立

阐明脑肿瘤干细胞表型可塑性和表型转换的现实并建立克服它们的方法

• 批准号: 22K07177
• 负责人: サンペトラ オルテア
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K07177/
• 关键词: 脳腫瘍; 幹細胞; 可塑性; 免疫応答; 癌幹細胞; 悪性脳腫瘍; 表現型可塑性

細胞の表現型の可塑性は細胞がゲノムの変化なく表現型のみを変化させる能力として理解されている。可塑性は個体発生において重要な役割を果たすことが知られているが、近年、癌細胞、特に癌幹細胞が環境の変化に適応する過程においても注目されている。しかし、腫瘍組織における表現型可塑性の実態が充分に解明されておらず、有効な阻害方法も確立されていない。申請者はこれまでの研究で、脳腫瘍幹細胞が代謝可塑性を発揮することで酸素や糖の不足に可逆的な適応反応を示し、そして、その際の表現型の変化が薬剤抵抗性を引き起こすことを見出した。本研究では脳腫瘍幹細胞の表現型可塑性を誘導する微小環境因子を広く探索し、明らかにすることを目指し、2022年度はまず3つの評価系を確立した。１．培養脳切片を用いたex vivo評価系の確立：正常脳並びに腫瘍を移植した脳より脳切片を作製、培養した。Iba1, CX3CR1等に対する抗体を用いたイメージングにより腫瘍細胞と脳内常在型免疫細胞の相互作用を可視化した。また、培養条件を変えることによって微小環境を変化させた上で切片より線条体、脳表などの部位ごとに組織を摘出し、フラクス・アナライザーで代謝を測定するアッセイ系を確立した。２．免疫細胞の評価系の確立：脳切片ではマイクログリア、星状細胞など、脳内に存在する免疫応答関連細胞の解析が可能であるが、血流が途絶えているため、T細胞やB細胞などの全身免疫応答関連細胞の解析は困難である。末梢免疫系の影響を検証するため、正常脳並びに腫瘍を移植した脳の免疫細胞のみを単離し、10-15種類の細胞をフローサイトメトリーによって同時に解析することで微小環境の詳細な評価を行うことに成功した。3．免疫応答が異なる腫瘍より3種類の脳腫瘍幹細胞を新しく樹立し、その遺伝子発現プロフィルの解析を始めた。

Cell <s:1> phenotype <e:1> plasticity <e:1> cell がゲノム <s:1> transformation なく phenotype <e:1> みを transformation させる ability と て て て understanding されて る る る. Plasticity は individuals born 発 に お い て important な "を cut fruit た す こ と が know ら れ て い る が, in recent years, the cancer cells, に が environment の cancer stem cells - the に optimum 応 す る process に お い て も attention さ れ て い る. し か し, swollen sores に お け る phenotype plasticity の state be が に fully interpret さ れ て お ら ず, unseen も な resistance against method established さ れ て い な い. Applicants は こ れ ま で の research で, 脳 swollen sores stem cell metabolic plasticity が を 発 swing す る こ と で acid element や sugar insufficient の に reversible な optimum 応 anti 応 を し, そ し て, そ の interstate の phenotype の variations change が 薬 tonic resistance を lead き up こ す こ と を shows し た. This study で は 脳 swollen sores stem cells の phenotype plasticity induced す を る small environmental factors を hiroo く explore し, Ming ら か に す る こ と を refers し, 2022 annual は ま ず 3 つ の review を 価 department establish し た. 1. Cultivate 脳 slice を with い た ex vivo evaluation 価 の established: normal 脳 and び に swollen sores を transplantation し た 脳 よ り 脳 slice を system, cultivate し た. を Iba1, CX3CR1 に す seaborne る antibody with い た イ メ ー ジ ン グ に よ と り swollen sores cells in type of immune cell の interaction in the 脳 を visualization し た. を ま た, cultivating conditions - え る こ と に よ っ て を tiny environment - the さ せ た で section on よ り line body, 脳 table な ど の parts ご と に organization を pick out し, フ ラ ク ス · ア ナ ラ イ ザ ー で determination of metabolic を す る ア ッ セ を イ department establish し た. 2 Immune cells の review 価 の established: 脳 slice で は マ イ ク ロ グ リ ア, stellate cells な ど exist, 脳 に す る immune 応 answer masato analytical が may even cell の で あ る が, blood flow が way off え て い る た め や B cells, T cells な ど の systemic immune 応 answer masato analytical は difficult even cell の で あ る. Card of peripheral immune system の influence を 検 す る た め and normal 脳 び に swollen sores を transplantation し た 脳 の immune cells の み を 単 し, 10 to 15 kinds の cells を フ ロ ー サ イ ト メ ト リ ー に よ っ て に analytical at the same time す る こ と で tiny environment の な detailed review 価 を line う こ と に successful し た. 3 Immune 応 answer が different な る swollen sores よ り 3 kinds の 脳 swollen sores stem cells を new し く し, そ の heritage 伝 son 発 now プ ロ フ ィ ル の parsing を beginning め た.

项目成果

酸化的リン酸化阻害剤による脳腫瘍幹細胞低酸素ニッチの制御法

如何利用氧化磷酸化抑制剂控制脑肿瘤干细胞的缺氧生态位

• 发表时间: 2022
• 作者: Chonan Yuta;Yamashita Tadahiro;Sampetrean Oltea;Saya Hideyuki;Sudo Ryo;サンペトラ オルテア
• 通讯作者: サンペトラ オルテア

What can metabolites tell us about gliomas?

关于神经胶质瘤，代谢物能告诉我们什么？

• DOI: 10.1093/neuonc/noac128
• 发表时间: 2022
• 期刊: Neuro-Oncology
• 影响因子: 15.9
• 作者: Sampetrean Oltea;Saya Hideyuki
• 通讯作者: Saya Hideyuki

Spatial Heterogeneity of Invading Glioblastoma Cells Regulated by Paracrine Factors

旁分泌因子调节侵袭胶质母细胞瘤细胞的空间异质性

• DOI: 10.1089/ten.tea.2021.0168
• 发表时间: 2022
• 期刊: Tissue Engineering Part A
• 影响因子: 4.1
• 作者: Chonan Yuta;Yamashita Tadahiro;Sampetrean Oltea;Saya Hideyuki;Sudo Ryo
• 通讯作者: Sudo Ryo

脳腫瘍幹細胞の不均一性と治療抵抗性

脑肿瘤干细胞的异质性和治疗耐药性

• 发表时间: 2022
• 作者: Chonan Yuta;Yamashita Tadahiro;Sampetrean Oltea;Saya Hideyuki;Sudo Ryo;サンペトラ オルテア;サンペトラ オルテア
• 通讯作者: サンペトラ オルテア