Mechanism of tumor progression mediated by secreted factors in adipocytes

脂肪细胞分泌因子介导的肿瘤进展机制

• 批准号: 22K07196
• 负责人: 前田 真男
• 金额: $ 2.41万
• 依托单位: Fujita Health University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K07196/
• 关键词: 卵巣がん; 脂肪細胞; DPP4; 腫瘍間質; がん; 分泌因子

卵巣がん患者の手術検体から樹立したヒト異種移植腫瘍（PDX）と脂肪組織由来幹細胞（ADSC）を用いた解析で、脂肪細胞から分泌されるDPP4が卵巣がんの進展に関わっていることを見出している。DPP4は標的タンパク質のN末端を切断してタンパク質の生物活性を失わせるペプチターゼで活性部位はC末端にあり、その変異体（H750E）はペプチターゼとしての活性がないことは過去に報告されている。本研究では、DPP4の野生型と失活型を作成し、DPP4ががんを進展させる機序の解析をすすめている。（１）DPP4の野生型および失活型の作成および精製：私たちはDPP4の野生型とペプチターゼとしての活性を失わせた失活型（H750E）を作成した。これらDPP4の野生型と失活型のC末端にHisタグをつけて、HEK293細胞に強制発現させてニッケルビーズの入ったカラムで精製することに成功した。（２）精製したDPP4が卵巣がん細胞におよぼす影響の解析：ADSC細胞中のDPP4をノックダウンすると、ADSC細胞と卵巣がんPDX細胞を混合培養した時に増強されたスフェロイド形成能が抑制されるが、ここに精製した野生型のDPP4を加えると、セフェロイド形成能がレスキューされた。さらに、卵巣がんPDX細胞にADSC細胞を加えずに精製した野生型のDPP4のみ加えると、スフェロイドの形成が促進されることも確認した。また、PDX細胞に精製した失活型のDPP4を加えても、スフェロイドの形成は促進されなかった。DPP4を加えた卵巣がんPDX細胞のqPCRによりがん幹細胞性に関わると考えられている遺伝子のうちいくつかの遺伝子の転写量が有意に上昇していることが確認できた。これらの結果より、脂肪細胞から分泌されているDPP4がC末端にある活性部位を介して、卵巣がんのがん幹細胞生の亢進に関与していることが示唆された。

The patient's surgical explantation was performed using xenograft (PDX) and adipose tissue-derived stem cells (ADSC). It is used to analyze and secrete DPP4 in fat cells, and to use it to analyze the progress of DPP4. DPP4 has the N-terminal cut-off of the target substance and the active site of the bioactive substance. C-terminal にあり, その変variant (H750E) はペプチターゼとしてのActivity がないことは Past に report されている. This study focused on the creation of wild-type and inactivated forms of DPP4, and the progress and analysis of the machine sequence of DPP4. (1) DPP4's wild type and inactivated type are made and refined: private DPP4's wild type Raw type とペプチターゼとしてのActivity を Loss わせたInactivation type (H750E) を成した.これらDPP4のWild type and inactivated typeのC-terminal Hisタグをつけて、HEK293 The cells are forced to appear and the cells are fine and refined and the cells are successful. (2) Analysis of the influence of purified DPP4 cells: DPP4 cells in ADSC cells, ADSC cells and PDX cells Mixed culture is used to increase the strength of the mixture, and the formation of energy is suppressed, and it is refined. The wild-type DPP4 is added with the えると, and the セフェロイド can be formed by the がレスキューされた.さらに, egg-derived PDX cells and ADSC cells をplus えずに refined したwild type のDPP4のみ加えると, スフェロイドの Formation が Promotion されることもConfirmation した.また、PDX cell purification and inactivation type のDPP4 を plus えても、スフェロイドの formation は promotion されなかった. DPP4を加えたovum がんPDX cells のqPCR によりがんStem cells に关わるとtest えられている伝子のうちいくつかの缝子の転无码不愿にriseしていることがconfirmできた. The result of これらのより, adipocyte から secretion されているDPP4 がC terminus にあるactive part The location of the stem cells, the stem cells of the stem cells, the promotion of stem cells, and the relationship between the stem cells and the stem cells.

项目成果

脂肪細胞から分泌されるDPP4が卵巣がんのがん幹細胞生を促進する

脂肪细胞分泌的DPP4促进卵巢癌干细胞的生命

• 发表时间: 2022
• 作者: Tsuji Shunya;Minami Shohei;Hashimoto Rina;Konishi Yusuke;Suzuki Tatsuya;Kondo Tamae;Sasai Miwa;Torii Shiho;Ono Chikako;Shichinohe Shintaro;Sato Shintaro;et al.;脇田将裕;脇田将裕;中西 真;近藤 祥司;南野 徹;高橋 暁子;前田真男
• 通讯作者: 前田真男