難治性乳がんに対する変異p53依存的悪性化・転移機構に対する分子基盤の解明

阐明p53突变依赖性乳腺癌恶性转化和转移机制的分子基础

• 批准号: 22K07205
• 负责人: 中山 哲俊
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K07205/
• 关键词: 難治性乳がん; 変異ｐ53; メバロン酸合成経路; がん悪性化形質

本研究は、難治性乳がんにおける変異p53のGain of Functionがもたらすメバロン酸合成経路(MVA経路)を介したがん悪性化制御機構の解明と、その悪性形質をもたらす直接的な下流標的分子の探索を目的としている。現在までに変異p53がメバロン酸合成(MVA)経路の鍵因子であるSterol regulatory element-binding protein 2(SREBP2)を介してその活性化を誘導し悪性化をもたらす機序を確認しており、更に変異p53とMVA経路をつなぐ鍵分子も見出している。そこでまず、乳がん細胞株であるMDA-MB-231細胞を用いてその鍵分子とSREBP2のKO細胞株を作成し、in vitroとin vivoの両方で悪性化への鍵分子の関与を確認した。更に変異p53でのみ鍵分子のプロモーター領域に直接結合することも確認し、変異p53による直接的な制御が確認できた。また、3次元培養において細胞外のコレステロール量の違いが悪性形質に変化を与えることも明らかとなった。そこで、scRNA-seq解析とノンターゲットプロテオミクスを実施したところ、変異p53による悪性形質をもたらす群では、脂質代謝やMVA経路などの分子群が活性化されていることが明らかとなった。また、scRNA-seq解析の結果からCDC42やRHOAなどのSmall G　proteinの発現が変異p53で上昇している可能性が示唆され、実際にCDC42を阻害すると悪性形質が消失することを確認した。これらの結果から、MVA経路の中でも特にGGPP経路とそれに続くRho-GTP活性を介したアクチンフィラメントの重合作用であるフィロポディアが悪性化に重要な役割を担っていることが示唆された。今後、今回までに明らかになった知見を用いてさらに解析を進める。

This study は, difficultly milk が ん に お け る - different p53 の Gain of Function が も た ら す メ バ ロ ン acid synthesis 経 road (MVA) 経 road を interface し た が ん 悪 sexual system of the royal institution の interpret と, そ の 悪 sexual character を も た ら す な dirty mark molecules directly の exploration を と し て い る. Now までに mutated p53がメバロ <e:1> acid synthesis (MVA) nuclear bond factor であるSterol regulatory element-binding protein 2 (SREBP2) を interface し て そ の activation induced し を 悪 sexualising を も た ら す machine sequence を confirm し て お り, more に - different p53 と MVA 経 road を つ な ぐ out key molecular も し て い る. そ こ で ま ず, milk が ん cell lines で あ る を MDA - MB - 231 cells with い て そ の key molecular と SREBP2 の KO cell lines を し, consummate the in vitro と in vivo の struck party で 悪 sexualising へ の key molecular の masato confirm with を し た. More に - different p53 で の み key molecular の プ ロ モ ー タ に ー field directly combined す る こ と も confirm し, - different p53 に よ る direct な suppression が confirm で き た. ま た, three yuan culture に お い て extracellular の コ レ ス テ ロ ー ル quantity の violations い が 悪 sexual character に variations change with え を る こ と も Ming ら か と な っ た. そ こ で, scRNA - seq analytic と ノ ン タ ー ゲ ッ ト プ ロ テ オ ミ ク ス を be applied し た と こ ろ, - different p53 に よ る 悪 sexual character を も た ら で す group は, lipid metabolism や MVA 経 な ど の molecular group of が activeness さ れ て い る こ と が Ming ら か と な っ た. ま た, scRNA - seq analytic results の か ら CDC42 や RHOA な ど の Small Gprotein の 発 が now - different p53 で rise し て い が る possibility in stopping さ れ, be interstate に CDC42 を resistance against す る と 悪 sexual character が disappear す る こ と を confirm し た. こ れ ら の results か ら, MVA 経 road の で も, に GGPP 経 road と そ れ に 続 く Rho - GTP activated を interface made し た ア ク チ ン フ ィ ラ メ ン ト の coincidence role で あ る フ ィ ロ ポ デ ィ ア が 悪 sexualising に cut を bear important な service っ て い る こ と が in stopping さ れ た. In the future and this time, までに will understand らに なった になった knowledge を and use てさらに てさらに to analyze を into める.

项目成果

Mechanism of Breast Cancer Malignant Transformation via Mevalonate Pathway by Mutant p53 Using Single Cell RNA-seq

使用单细胞 RNA-seq 研究突变 p53 通过甲羟戊酸途径导致乳腺癌恶性转化的机制

• 发表时间: 2022
• 作者: Nakayama A;Yokoyama M;Siti N Z;Seki G;Miya H;Hashimoto M;Yamagata K;Tanaka T.
• 通讯作者: Tanaka T.

Single Cell RNA-seq解析を用いた変異p53"Gain of Function"によるメバロン酸合成経路を介したがん悪性化機構の解明

使用单细胞 RNA-seq 分析阐明突变体 p53“功能获得”甲羟戊酸合成途径介导的癌症恶性肿瘤

• 发表时间: 2022
• 作者: 中山 哲俊;横山 真隆;永野 秀和;山形 一行;橋本 直子;村田 和貴;樋口 誠一郎;清野 透;田中 知明
• 通讯作者: 田中 知明

新規p53標的遺伝子lncRNA-1はヒト幹細胞の多能性を失わせDNA損傷に応答した細胞死を阻害する(p53-inducible lncRNA-1 causes the loss of pluripotency and prevents genotoxic stress-induced cell death in hESCs)

一种新的 p53 靶基因 lncRNA-1 可导致 hESC 多能性丧失并防止基因毒性应激诱导的细胞死亡。

• 发表时间: 2022
• 作者: 山形 一行;ザハラ・シティ;橋本 直子;中山 哲俊;藤本 真徳;横山 真隆;田中 知明
• 通讯作者: 田中 知明

新規p53標的遺伝子lncRNA-1のヒト乳がん細胞と肝細胞がん細胞での機能(The functional roles of p53-inducible lncRNA-1 on human breast cancer cells and hepatocellular carcinoma cells)

p53诱导的lncRNA-1对人乳腺癌细胞和肝癌细胞的功能作用

• 发表时间: 2022
• 作者: ザハラ・シティ;山形 一行;中山 哲俊;橋本 直子;藤本 真徳;横山 真隆;宮 英博;石 暁彦;田中 知明
• 通讯作者: 田中 知明

プロテオミクスによるMDM2が制御するフェロトーシスの分子基盤の探索

利用蛋白质组学探索 MDM2 调节的铁死亡的分子基础

• 发表时间: 2022
• 作者: 古木 直人;永野 秀和;中山 哲俊;藤本 真徳;横山 真隆;田中 知明
• 通讯作者: 田中 知明