機能獲得型変異ｐ53が制御する癌幹細胞化の解明と治療戦略の確立

阐明功能获得突变体p53控制的癌症干性并建立治疗策略

• 批准号: 22K19577
• 负责人: 前原 喜彦
• 金额: $ 4.16万
• 依托单位: Kyushu Central Hospital of the Mutual Aid Association of Public School Teachers
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-06-30 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K19577/
• 关键词: 癌幹細胞化; ｐ53機能獲得型変異; 遺伝子発現プロファイル; エピゲノム異常; p53機能獲得型変異; 癌の浸潤・転移

癌の克服を難しくさせる再発と転移の原因の一つに，抗癌剤治療に抵抗性を示す癌幹細胞が考えられる。癌の癌幹細胞化のメカニズムのひとつにエピゲノム異常が関与すると考えられ，癌抑制遺伝子p53機能獲得型変異体がエピゲノム異常を起こすことで癌の増殖を亢進させることが報告された。さらに最近の研究においていくつかのミスセンス変異体はp53ミスセンス変異体がクロマチン制御因子の発現上昇を誘導し，その結果ゲノムワイドにクロマチン制御を変化させることでエピゲノム異常を起こすことで癌の増殖を亢進させることが示され，あたかも‘癌遺伝子’のようにふるまうことが報告された。本研究はp53変異体が癌幹細胞化にどのような影響を与えるかを基礎研究で明らかにし，さらに臨床検体による大型コホートを用いてp53変異と癌幹細胞の関連性を明らかにすることで，p53変異ステータスが癌幹細胞の特性決定に起因するという従来とは全く異なる視点からの新規癌幹細胞形成モデルの提唱に挑戦する。初年度はp53機能獲得型変異体における遺伝子発現プロファイルの変化と癌幹細胞化の検証する研究項目を実施した。そのなかで，本研究遂行に必要とされるアイソジェニックなp53変異細胞株パネルを構築するために，野生型p53遺伝子をもつHCT116細胞をベースとし，ゲノム編集技術によりp53ノックアウト細胞，および異なる2種類のp53機能獲得型ミスセンス変異のノックイン細胞を樹立した。樹立したp53変異細胞では，機能獲得型ミスセンス変異p53が特異的に結合することが知られている転写因子ETS2との結合が確認された。また細胞内の遺伝子発現プロファイルの比較でも，ｐ53の野生型，欠損株，機能獲得型ミスセンス変異株の間には明確な違いが観察された。したがって本研究のモデル細胞として今回樹立したp53変異細胞株パネルの有用性が示された。

Cancer stem cells are resistant to anticancer drugs and are resistant to cancer therapy. Cancer stem cell differentiation is the result of abnormal growth and development of cancer suppressor gene p53. Recent studies have shown that the expression of a gene in a cell can be induced by p53, and that the expression of a gene in a cell can be induced by p53. This study is aimed at clarifying the impact of p53 heterogeneic cancer stem cell differentiation on basic research, and at clarifying the relevance of p53 heterogeneic cancer stem cells to clinical use of large cells. In the first year, the research project of p53 function acquisition, gene development, transformation and cancer stem cell transformation was carried out. In this study, we conducted the necessary research on the construction of wild-type p53 mutant cell lines, and established wild-type p53 mutant cells using an assembly technique to obtain p53 mutant cells with two different types of p53 function. The expression of p53 in cells with different functions is confirmed by the expression of ETS2 in cells with different functions. The expression of p53 in the wild type, defective strain, and gain-of-function mutant strains was clearly detected. The usefulness of the p53 mutant cell line was demonstrated by the results of this study.

项目成果

フッ化ピリミジン系抗癌剤をサイエンスする

氟嘧啶类抗癌药物科学

• 发表时间: 2022
• 作者: 野中謙太朗;飯森真人;北尾洋之;前原 喜彦
• 通讯作者: 前原 喜彦

DNA複製ストレス誘導性抗がん剤との併用における治療標的としてのATR制御の意義

ATR 调节作为与 DNA 复制应激诱导抗癌药物联合治疗靶点的意义

• 发表时间: 2022
• 作者: 野中謙太朗;飯森真人;北尾洋之
• 通讯作者: 北尾洋之