膜タンパク質を標的とした先端的がん特異的抗体の開発とその作用機序解明

开发针对膜蛋白的先进癌症特异性抗体并阐明其作用机制

基本信息

批准号：
22K07224
负责人：
加藤幸成
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K07224/
关键词：
がん特異的抗体モノクローナル抗体 CasMab 抗体

项目摘要

モノクローナル抗体は実験的ツールや診断薬としてだけでなく、様々ながん治療に応用されている。一方、がん細胞に特異的な抗体を樹立しなければ、常に正常組織への毒性が懸念される。しかし、がん細胞だけに高発現している分子は限られているため、新規の標的分子を発見するのは困難である。本課題においては、申請者が開発したがん特異的抗体作製法（CasMab法）や糖鎖改変技術（GpMab法）を駆使し、種々の糖タンパク質に対するがん特異的抗体を作製し、その有用性の証明および最適化を目指す。また、樹立したがん特異的抗体ががん細胞に特異性を示すメカニズムの解明を行う。これにより、これまで非常に困難だったがん特異的抗体が効率的に樹立でき、副作用のない抗体医薬や免疫療法の開発が可能となる。マウスに標的タンパク質発現細胞株あるいは分泌型の標的タンパク質を免疫することにより、標的HXに対する抗体のライブラリーを作製した。抗体のスクリーニングは、精製タンパク質や標的タンパク質発現細胞を用いて行った。細胞株を免疫する場合は、親株と発現株に対する反応性の違いを、フローサイトメトリーで検出した。その結果、フローサイトメトリーで強制発現株（CHO-K1やLN229への強制発現株）および内在性発現株（乳がん細胞株など）に対して高感度に反応する抗体が複数得られた。来年度は、これらの抗体の性状解析を実施する。具体的には、申請者が開発した独自の糖鎖不全株を用いた、糖鎖認識抗体の有無の確認、免疫組織染色によるがん細胞への特異性の有無の確認、標的タンパク質のどの部位を認識しているかの確認（エピトープ探索）、抗体のアフィニティー解析、がん特異性の確認などである。さらに、CasMab法の最適化を行い、HXに対する新規抗体作製を継続する。

单克隆抗体不仅用作实验工具和诊断剂，而且还应用于各种癌症治疗。另一方面，如果未建立特定于癌细胞的抗体，则始终担心会对正常组织存在毒性。但是，由于在癌细胞中仅高度表达了有限数量的分子，因此很难发现新的靶分子。在这个主题中，我们旨在通过申请人开发的癌症特异性抗体生产方法（CASMAB方法）（CASMAB方法）（CASMAB方法）（CASMAB方法）（CASMAB方法）（CASMAB方法）（CASMAB方法）来证明和优化针对各种糖蛋白的癌症特异性抗体的实用性。此外，我们将阐明癌症特异性抗体显示出对癌细胞特异性的机制。这允许有效地建立癌症特异性抗体，到目前为止，这些抗体非常困难，并能够开发出没有副作用的抗体药物和免疫疗法。通过用表达靶蛋白的细胞系或分泌靶蛋白的小鼠免疫小鼠来产生针对靶HX的抗体库。使用纯化的蛋白质和靶向蛋白质的细胞筛选抗体。当免疫细胞系免疫时，通过流式细胞仪检测到对母体和表达菌株的反应性差异。结果，通过流式细胞仪获得了多种对强烈表达菌株（例如CHO-K1或LN229强制表达菌株）和内源表达菌株（例如乳腺癌细胞系）的多种反应的抗体。这些抗体的特征分析将于明年进行。具体而言，使用申请人开发的独特的糖基化菌株，检查是否存在糖基化识别抗体，检查是否通过免疫组织化学染色对癌细胞的特异性检查，检查靶蛋白的哪个位点识别（表位搜索）（EpiTope搜索）（表位搜索），对抗体的亲和力分析，对抗体的特定性和认识性癌症特异性。此外，对Casmab方法进行了优化，并继续生产针对HX的新抗体。

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

がん特異的抗体の開発とその臨床応用

癌症特异性抗体的研制及其临床应用

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
Suzuki Hiroyuki;Ohishi Tomokazu;Asano Teizo;Tanaka Tomohiro;Saito Masaki;Mizuno Takuya;Yoshikawa Takeo;Kawada Manabu;Kaneko Mika;Kato Yukinari;加藤幸成
通讯作者：
加藤幸成

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