膜タンパク質を標的とした先端的がん特異的抗体の開発とその作用機序解明

开发针对膜蛋白的先进癌症特异性抗体并阐明其作用机制

• 批准号: 22K07224
• 负责人: 加藤 幸成
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K07224/
• 关键词: がん特異的抗体; モノクローナル抗体; CasMab; 抗体

モノクローナル抗体は実験的ツールや診断薬としてだけでなく、様々ながん治療に応用されている。一方、がん細胞に特異的な抗体を樹立しなければ、常に正常組織への毒性が懸念される。しかし、がん細胞だけに高発現している分子は限られているため、新規の標的分子を発見するのは困難である。本課題においては、申請者が開発したがん特異的抗体作製法（CasMab法）や糖鎖改変技術（GpMab法）を駆使し、種々の糖タンパク質に対するがん特異的抗体を作製し、その有用性の証明および最適化を目指す。また、樹立したがん特異的抗体ががん細胞に特異性を示すメカニズムの解明を行う。これにより、これまで非常に困難だったがん特異的抗体が効率的に樹立でき、副作用のない抗体医薬や免疫療法の開発が可能となる。マウスに標的タンパク質発現細胞株あるいは分泌型の標的タンパク質を免疫することにより、標的HXに対する抗体のライブラリーを作製した。抗体のスクリーニングは、精製タンパク質や標的タンパク質発現細胞を用いて行った。細胞株を免疫する場合は、親株と発現株に対する反応性の違いを、フローサイトメトリーで検出した。その結果、フローサイトメトリーで強制発現株（CHO-K1やLN229への強制発現株）および内在性発現株（乳がん細胞株など）に対して高感度に反応する抗体が複数得られた。来年度は、これらの抗体の性状解析を実施する。具体的には、申請者が開発した独自の糖鎖不全株を用いた、糖鎖認識抗体の有無の確認、免疫組織染色によるがん細胞への特異性の有無の確認、標的タンパク質のどの部位を認識しているかの確認（エピトープ探索）、抗体のアフィニティー解析、がん特異性の確認などである。さらに、CasMab法の最適化を行い、HXに対する新規抗体作製を継続する。

The antibody is used for diagnosis and treatment. A cell-specific antibody is established, and the toxicity of normal tissues is often suspected. It is difficult to find new molecules in the cell. This project aims to provide guidance for the development of specific antibody production methods (CasMab method) and glycan lock modification techniques (GpMab method), the identification of specific antibody production methods, and the validation and optimization of their usefulness. The cell specificity of the antibody is demonstrated by the identification of specific antibodies. It is very difficult to establish the efficiency of specific antibodies, side effects and the possibility of developing antibody medicine and immunotherapy. The target protein is produced in cell lines that secrete target protein. The antibody is purified and purified from the protein. The protein is produced in cells. Cell line immunity, parent strain development, anti-virus, anti-virus As a result, multiple antibodies were obtained against the highly sensitive resistant strains (CHO-K1 and LN229) and the intrinsically resistant strains (milk cells). In the future, the analysis of antibody properties will be carried out. Specific requirements, application of the applicant for the development of a unique glycan incomplete strain, confirmation of the presence or absence of glycan recognition antibody, confirmation of the presence or absence of cell specificity by immunostaining, recognition of the site of the target quality (exploration), antibody analysis, confirmation of specificity. The optimization of CasMab method and HX method are discussed in detail.

项目成果

がん特異的抗体の開発とその臨床応用

癌症特异性抗体的研制及其临床应用

• 发表时间: 2022
• 作者: Suzuki Hiroyuki;Ohishi Tomokazu;Asano Teizo;Tanaka Tomohiro;Saito Masaki;Mizuno Takuya;Yoshikawa Takeo;Kawada Manabu;Kaneko Mika;Kato Yukinari;加藤幸成
• 通讯作者: 加藤幸成

Defucosylated mouse-dog chimeric anti-HER2 monoclonal antibody exerts antitumor activities in mouse xenograft models of canine tumors

• DOI: 10.3892/or.2022.8366
• 发表时间: 2022-09-01
• 期刊: ONCOLOGY REPORTS
• 影响因子: 4.2
• 作者: Suzuki，Hiroyuki;Ohishi，Tomokazu;Kato，Yukinari
• 通讯作者: Kato，Yukinari

東北大学大学院医学系研究科抗体創薬学分野

东北大学医学研究科抗体药物开发系