赤血球結合IgGのサブクラス別測定法の確立とAIHAにおける溶血機序の考察

红细胞结合IgG亚类测定方法的建立及AIHA溶血机制的思考

• 批准号: 22K07472
• 负责人: 山城 安啓
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Yamaguchi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K07472/
• 关键词: 自己免疫性溶血性貧血（AIHA）; IgG1; IgG3; Coombs試験; フローサイトメトリー; AIHA; IgGサブクラス

フローサイトメトリーによる赤血球結合IgGのサブクラス別定量法を確立することを目指した。①当初予定していた福山臨床検査センターの研究協力者の体調不良による退職のため、BeckmanCoulter CytoFLEXから山口大学医学部保健学科に設置してあるMACSQuant Analyzer10で解析を行うこととなった。まずサブクラス別測定をするための基礎技術である赤血球結合IgG定量法の技術の獲得と信頼性のあるデータを出すためのトレーニングから始めた。健常検体と主治医からインフォームド・コンセントが得られ赤血球結合IgG定量検査目的で福山臨床検査センターに送付された検体を用いて検討を行った。福山臨床検査センターの検体は冷蔵で山口大学に輸送してもらった。使用した抗体は福山臨床検査センターで使用している抗体と同じものを使用した。結果は、機種間の違いにより測定値が約10倍違うが、関連性のある値が得られた。検体の古さにより、若干結果が乖離する検体があったため、原因を追求する必要がある。②赤血球結合IgGのサブクラス別定量を行うため、IgG1およびIgG3抗体を３つのメーカーから購入した。市販されている抗体は、メーカーにより結合性の違いから分布と平均値にかなりの差が認められ、結果が異なってくるため、種々の抗体を調べ、高感度で特異性の高い抗体を検索する必要がある。また、使用する抗体量や反応温度、時間などの最適化が必要である。現在、この抗体を用いて健常検体を測定し、使用可能かどうか検討中であるが、低値であるため高値検体の測定が必要である。③福山臨床検査センターに送られてきた検体はCoombs試験陰性のAIHA疑いの検体であるため、先天的な異常を除外するため、グロビン遺伝子定量やシーケンシングにより確認をしている。

A quantitative method for erythrocyte-bound IgG was established. 1. The analysis of MACS Quant Analyzer10 was carried out by the Department of Health Care, Yamaguchi University School of Medicine, BeckmanCoulter CytoFLEX. The basic technology of red blood cell binding IgG quantitative method The aim of this study was to obtain a quantitative analysis of erythrocyte-bound IgG in healthy subjects. Fukuyama Clinical Research Center and the Department of Health of Yamaguchi University The use of antibodies in Fukuyama clinical trials The results show that the measurement value of the model is about 10 times that of the model, and the correlation value is obtained. The reason for this is that there are some reasons why the body is different from the body. 2. Erythrocyte-bound IgG is not available for quantitative analysis. IgG1 and IgG3 antibodies are not available for purchase. The market for antibodies is different, the binding is different, the distribution is different, the difference is different, the results are different, the species of antibodies are different, the sensitivity is high, the specificity is high, and the detection of antibodies is necessary. It is necessary to optimize the quantity of antibody used, reaction temperature and time. Now, this antibody is used to detect the normal body, and the use of the medium value is necessary. 3. Fukuyama Clinical Examination: The test results are negative for AIHA, except for congenital abnormalities.