Development of hepatic artery embolization using cancer-accumulating contrast medium for delivery of microRNA therapeutics aiming at recurrence-free

开发使用癌症蓄积造影剂的肝动脉栓塞术，以实现无复发的 microRNA 治疗

• 批准号: 22K07734
• 负责人: 平田 豊
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Hyogo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K07734/
• 关键词: exosome; microRNA; ガン; 肝動脈塞栓術; lipiodol; DDS; 無再発

肝動脈塞栓術は、油性造影剤・lipiodolの選択的ガン集積の画像診断下に、塞栓物質で肝ガンの栄養血管を閉塞し、ガンを阻血壊死させる低侵襲の治療法である。切除不能な肝ガンに広く行われているが、再発ガンが高頻度に認められ、悪性化すると治療困難となる。一方で、ガンが完全に消滅する無再発の症例も報告されている。この治療効果の違いには不明な点が多く、新たなアプローチによる治療法の開発が急務である。 近年、ガン細胞が分泌するexosomeに内包されるmiRNA (microRNA)が、発ガンや悪性化に深く関与していることが注目されている。そこで、ガンの再発を阻止するmiRNAを同定し、lipiodolを用いて、選択的にガン細胞に送達するDDSを開発すれば、肝動脈塞栓術の治療成績向上に寄与できるのではないかという着想に至った。本研究の最終目的は、ガン抑制型miRNAを発現するplasmidが、lipiodolの油滴中に内包されたエマルジョンを作製し、ガン細胞に選択的に集積する新規の抗ガン核酸薬の開発基盤を構築することである。これまでに、我々の患者血液サンプルを用いたmiRNA microarray解析から、肝動脈塞栓術の再発ガン患者だけでなく、無再発ガンの血中のexosomeに特異的な21個のmiRNAを見出した。これらのmiRNAの合成mimicの中には、ヒト癌ガン細胞株(HCT116、HuH7) の生存率を50％以下にまで低下させたmiRNAが見出された。現在、このmiRNAの標的遺伝子の網羅的解析が進行中である。また、無再発メカニズムの経路において、exosomeを介してmiRNAが抗ガン作用をしているかを明らかにすることを目指している。具体的には、exosomeにluciferaseとmCherryを局在させるために、CD63との融合タンパク質を発現するplasmidの作製ができている。今後、in vitroやin vivoで、そのexosomeを取り込んだ細胞において、luciferaseの発光とmCherryの蛍光が検出できるかを検証する。

Hepatic artery embolization, oil contrast agent, lipodol, etc., under the diagnosis of liver thrombosis, blocking substances, liver blood vessels, blood stasis, low invasion treatment. The liver cannot be resected, and it is difficult to treat the disease. No further symptoms were reported after complete elimination. The treatment results are unclear, and the development of new treatments is urgent. In recent years, miRNA (microRNA) secreted by exosomes of cells has been closely related to sexual development. The development of DDS and hepatic artery embolization therapy results are reported in the same way as miRNA, lipodol, and cellular delivery. The ultimate goal of this study is to construct a novel anti-miRNA development matrix for the development of plasmid and lipodol miRNAs and their inclusion in oil droplets. The miRNA microarray analysis of these patients 'blood samples revealed 21 miRNAs specific to the exosome in the blood of patients with or without hepatic embolism. The miRNA synthesis in these cells was lower than 50% in survival rate of HCT116 and HuH7 cell lines. Now, the analysis of miRNA target gene is in progress. The miRNA pathway, exosome, and anti-miRNA effects are described in detail below. The specific plasmid-like structure of CD63 and exosomes is described in detail below. In the future, in vitro, in vivo, in vivo,

项目成果

肺RFA患者の血液中exosome由来のmicroRNA

源自肺部 RFA 患者血液中外泌体的 MicroRNA

• 发表时间: 2023
• 作者: 平田 豊;高木 治行;小林 薫;加古 泰一;小笠原 篤;児玉 大志;谷口 純一;河本 悠;高萩 基仁;吉村 奈穂美;山門 亨一郎
• 通讯作者: 山門 亨一郎

Exosomal microRNAs in the blood of lung RFA patients

肺 RFA 患者血液中的外泌体 microRNA

• 发表时间: 2022
• 作者: Yutaka Hirata;Haruyuki Takaki;Kaoru Kobayashi;Yasukazu Kako;Atsushi Ogasawara;Hiroshi Kodama;Junichi Taniguchi;Yu Kawamoto;Motonori Takahagi;Taiki Morimura;Nahomi Yoshimura;Koichiro Yamakado
• 通讯作者: Koichiro Yamakado