Exploratory study in immunoadjuvant therapy for pediatric acute myeloid leukemia

小儿急性髓系白血病免疫辅助治疗的探索性研究

• 批准号: 22K07866
• 负责人: 岩本 彰太郎
• 金额: $ 2.33万
• 依托单位: Mie University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K07866/
• 关键词: 小児急性骨髄性白血病; アントラサイクリン系抗がん剤; 細胞接着依存性薬剤耐性; 骨髄微小環境; 免疫アジュバント

急性骨髄性白血病(AML)に罹患した小児患者の約3割は再発・難治例である。AMLの治療抵抗性機序として骨髄白血病微小環境で形成される細胞接着依存性薬剤耐性（CAM-DR）が知られているが、その分子機構については十分に解明されていない。本研究の目的は、in vitroヒトAML-骨髄微小環境モデルを用いて、AML治療のキードラッグであるアントラサイクリン系抗がん剤（AAD）に対する AML細胞のCAM-DR克服のためにNFkB 活性化シグナルに着目した免疫アジュバントの探索的研究にある。本年度は以下の実験結果を得た。【AML細胞株の骨髄間質細胞（BMSC）共培養下でのAAD耐性化とNFkB阻害剤の効果の検討】AML細胞株（U937,THP-1, HEL,NB4,Nomo1,MOLM13）の抗がん剤（AADとしてドキソルビシン使用）に対する50％致死濃度（LC50）の決定とBMSC共培養下でのCAM-DR獲得評価：AML細胞株毎に抗がん剤に対するLC50を決定後、BMSC共培養下で無血清培養液を用いてAML細胞株のCAM-DR獲得を殺細胞比率（FACS）で評価した。すべての細胞株がBMSC共培養下でCAM-DRを獲得したことを確認した。【NFkB阻害剤（SN50及びEmetine）による両細胞群共培養下での抗がん剤に対するCAM-DR克服効果の検討】NFkB阻害剤を用いた共培養実験で、AML細胞株（THP-1,HEL,MOLM13）のCAM-DR阻害効果をFACSにて評価した。すべての細胞株で程度の差はあるものの有意差を持ってCAM-DR阻害効果を認めた。本年度は、共培養下での両細胞群（AML細胞株とBMSC）のNFkBに関する分子生物学的変化を評価する前に、NFkB阻害剤の効果を確認することで研究仮説の妥当性を見出すことができた。

大约30％患有急性髓样白血病（AML）的儿科患者是反复出现或难治性病例。细胞粘附依赖性耐药性（CAM-DR）在髓样白血病微环境中形成，被称为AML的一种耐药机制，但尚未完全了解其分子机制。这项研究的目的是使用体外人类AML骨骨髓微环境模型探索免疫佐剂，以克服AML细胞中针对蒽环类药物抗癌药物（AAD）的CAM-DR，这是AML治疗的关键药物，重点是NFKB激活信号。今年，获得了以下实验结果。 [研究AML细胞系的AAD抗AAD对AAD的抗性（BMSC）共培养以及NFKB抑制剂的影响]测定50％致死浓度（LC50）的抗癌药物（使用阿莫糖蛋白作为AAD）的抗癌药物（使用AML cam-cam-cam-cam-cam-13，u937，thp-1，thp-1，helm，NB4，NB4，NB4，NB4，NB4，NB4，NB4，NB4，NB4，NB4，NB4，NB4，NB4 BMSC共培养下的采集：在确定每种AML细胞系的抗癌药物LC50后，使用BMSC共培养下的无血清培养基评估AML细胞系中的CAM-DR在AML细胞系中的采集。已经证实，所有细胞系在BMSC共培养下均获得CAM-DR。 [在使用NFKB抑制剂的共培养实验中，对NFKB抑制剂（SN50和雌激素）在两个细胞组共培养下克服CAM-DR对抗癌药物的影响的解释，使用FACES评估了AML细胞系的CAM-DR抑制作用（THP-1，HEL，MOLM13）。所有细胞系均显示出明显的CAM-DR抑制作用，尽管在不同程度上。今年，我们能够通过检查NFKB抑制剂的效果在评估两个细胞组（AML细胞系和BMSC）的分子生物学变化之前，通过检查NFKB抑制剂的效果来找到研究假设的有效性。