HBV HBxを標的とした創薬の多角的アプローチ： cccDNA排除を目指して

针对 HBV HBx 的药物发现的多方面方法：旨在消除 cccDNA

• 批准号: 22K07980
• 负责人: 山下 篤哉
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: University of Yamanashi
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K07980/
• 关键词: HBV; HBx; cccDNA; 抗ウイルス化合物

HBV蛋白質の一つHBxはcccDNAの安定化と維持に必須である。本研究では、cccDNAの維持に関与しているHBxの以下の3つの過程①転写制御過程、②タンパク分解過程、③cccDNA制御過程の3つの部位を標的とし、多角的なアプローチでHBV cccDNA排除可能な化合物の探索をおこなっている。まず、①転写制御過程については、HBx はEnhancer I-X promoterによって発現が制御される。そこで、Enhancer I-X promoter転写活性をLuciferase活性で測定出来るレポーター細胞（Enhancer I-X promoter Luc細胞）を作製し、Enhancer I-X promoter転写活性を抑制し、抗HBV活性を有する化合物の同定を試みた。）スクリーニングソースとして、FDA-approved drug library（1470化合物）を用いてスクリーニングを行った。その結果、Enhancer I-X promoter活性を抑制する22化合物を見出した。これらのヒット化合物について、Enhancer I-X promoter抑制活性の詳細な解析及びHepG2.2.15.7細胞を用いた抗HBV活性を検討した結果、Cariprazin(抗精神病薬)、Aripiprazole(抗精神病薬)、Vorapaxar(抗血栓薬)、及びFosaprepitant dimeglumine(制吐薬)の4種のヒット化合物を得た。更に、これら化合物の抗HBV活性をHepG2 -hNTCP-C4細胞及びPXBマウスから分離された新鮮ヒト肝細胞PXB細胞を用いて確認したところHBV感染抑制活性が見られた。また、Hep38.7 tet細胞を用いて、cccDNA産生抑制活性評価したところ、いずれの化合物も細胞内cccDNA量を有意に減少させた。

HBV protein stability and maintenance of HBx and cccDNA must be achieved. In this study, the following three processes related to the maintenance and degradation of HBV cccDNA were studied: ① control process, ② decomposition process, ③ control process of HBV cccDNA. HBx is an Enhancer I-X promoter. (c) Enhancement of I-X promoter activity and determination of Luciferase activity in cells (Enhancement of I-X promoter Luc cells) The FDA-approved drug library (1470 compound) is used in the field of drug detection. The results showed that 22 compounds inhibited Enhancer I-X promoter activity. Detailed analysis of inhibitory activity of these compounds and evaluation of anti-HBV activity in HepG2.2.15.7 cells. Four compounds were identified: Cariprazin(antipsychotic), Aripiprazole (antipsychotic), Vorapaxar(antithrombotic), and Fosapitant dimetidine (pharmaceutical). In addition, the anti-HBV activity of these compounds was confirmed in HepG2-hNTCP-C4 cells and PXB cells isolated from fresh hepatocytes. Hep38.7 tet cells were treated with CCDNA-producing inhibitory activity. The CCDNA-producing activity of Hep38.7 tet cells was evaluated by using CCDNA-producing compounds.

项目成果

Novel Neplanocin A Derivatives as Selective Inhibitors of Hepatitis B Virus with a Unique Mechanism of Action

新型 Neplanocin A 衍生物作为乙型肝炎病毒的选择性抑制剂，具有独特的作用机制

• DOI: 10.1128/aac.02073-21
• 发表时间: 2022
• 期刊: Antimicrobial Agents and Chemotherapy
• 影响因子: 4.9
• 作者: Masaaki Toyama;Koichi Watashi; Masanori Ikeda; Atsuya Yamashita;Mika Okamoto;Kohji Moriishi;Masamichi Muramatsu; Takaji Wakita;Ashoke Sharon;Masanori Baba
• 通讯作者: Masanori Baba

HBV Enhancer I-X promoterをターゲットとした抗HBV化合物の探索

寻找针对 HBV 增强子 I-X 启动子的抗 HBV 化合物

• 发表时间: 2022
• 作者: 山下篤哉;葛西宏威;田中智久;大津直樹;赤池康範;前川伸哉;榎本信幸;森石恆司
• 通讯作者: 森石恆司

HBV Enhancer I-X promoterをターゲットとした抗HBV化合物の同定とその抑制機序

靶向HBV增强子I-X启动子的抗HBV化合物的鉴定及其抑制机制

• 发表时间: 2022
• 作者: 山下篤哉;葛西宏威;田中智久;大津直樹;赤池康範;森石恆司
• 通讯作者: 森石恆司