抗菌ペプトイドを用いた新規B型肝炎治療薬の開発

自然免疫系の構成要素であり宿主の一次防衛を担う抗菌ペプチドは、細菌のみならずウイルスに対しても阻害活性を持つことが知られている。この抗菌ペプチドは強い生理活性を持つことから創薬の基盤分子として注目されてきたが、生体内ではプロテアーゼにより速やかに分解され、また膜透過性が低いため治療薬としての応用が難しい。そこで近年、抗菌ペプチドの問題点を克服するためにN置換グリシンオリゴマーを用いたペプチド模倣物、いわゆるペプトイドが開発された。このペプトイドはプロテアーゼ耐性で生体内でも安定であるため、抗菌ペプチドに代わる新たな創薬基盤として注目されている。そこで、本研究では様々な構造と側鎖を持ったペプトイドをスクリーニングし、HBVに阻害活性をもつペプトイドを同定し、その作用機序を検証することを目的とした。今年度は12種類のペプトイドのライブラリをスクリーニングし、抗HBV活性を持つペプトイドの同定を行なった。陽性コントロールとして、様々なウイルスに対する抗ウイルス活性が報告されている抗菌ペプチドであるLL37を用いた。簡便にHBVの感染能の評価が可能なHBVレポーターウイルスを産生するプラスミドを培養細胞に導入し、ペプトイドを含む培地で培養することによりHBVの産生能と感染に与える影響を解析した。その結果、抗HBV活性を持つ3種類のペプトイドが同定された。これらのペプトイドはHBs抗原量は低下させないが、産生されたHBVレポーターウイルスの感染力価を低下させることが分かった。今後、これらの抗HBV活性を持つペプトイドのHBVライフサイクルにおける作用点の解析を行う。

自然免疫系の構成要素であり宿主の一次防衛を担う抗菌ペプチドは、細菌のみならずウイルスに対しても阻害活性を持つことが知られている。この抗菌ペプチドは強い生理活性を持つことから創薬の基盤分子として注目されてきたが、生体内ではプロテアーゼにより速やかに分解され、また膜透過性が低いため治療薬としての応用が難しい。そこで近年、抗菌ペプチドの問題点を克服するためにN置換グリシンオリゴマーを用いたペプチド模倣物、いわゆるペプトイドが開発された。このペプトイドはプロテアーゼ耐性で生体内でも安定であるため、抗菌ペプチドに代わる新たな創薬基盤として注目されている。そこで、本研究では様々な構造と側鎖を持ったペプトイドをスクリーニングし、HBVに阻害活性をもつペプトイドを同定し、その作用機序を検証することを目的とした。今年度は12種類のペプトイドのライブラリをスクリーニングし、抗HBV活性を持つペプトイドの同定を行なった。陽性コントロールとして、様々なウイルスに対する抗ウイルス活性が報告されている抗菌ペプチドであるLL37を用いた。簡便にHBVの感染能の評価が可能なHBVレポーターウイルスを産生するプラスミドを培養細胞に導入し、ペプトイドを含む培地で培養することによりHBVの産生能と感染に与える影響を解析した。その結果、抗HBV活性を持つ3種類のペプトイドが同定された。これらのペプトイドはHBs抗原量は低下させないが、産生されたHBVレポーターウイルスの感染力価を低下させることが分かった。今後、これらの抗HBV活性を持つペプトイドのHBVライフサイクルにおける作用点の解析を行う。