肝がんにおける循環癌間質細胞の特性と臨床的意義の探索

癌は癌細胞と、周囲に血管新生や線維化、炎症や免疫抑制などに関係する異常な間質細胞である癌間質細胞からなり、固体により異なる個性的な癌細胞社会を形成していく。この活性化した癌間質細胞には血管新生や免疫チェックポイントなど癌治療における重要な標的分子が発現している。本研究は代表的な難治癌である肝癌に着目し、肝癌において癌間質細胞が癌の悪性形質にどのように寄与するのかを解明し、さらに癌局所から全身の血中に流出する循環癌間質細胞(Circulating Cancer-Associated Stromal Cells : C-CAST)の有無とその特性および肝癌バイオマーカーとしての有用性を明らかにする事を目的とした。本年度は、肝癌患者の循環腫瘍細胞と循環非腫瘍細胞を含むと考えられる末梢血循環細胞を用いた1細胞トランスクリプトーム解析を行うことにより、肝癌患者の予後に寄与する循環血液細胞または細胞集団の同定を試みた。今回、肝癌患者2例の末梢血循環細胞を用いた1細胞トランスクリプトーム解析により細胞集団をクラスタリングし、肝癌患者に共通する特徴的な循環細胞集団を同定した。同定した細胞集団の中の2つの細胞集団に関して特徴的に発現する分子を同定することに成功した。さらに、これらの特徴的に高発現する分子を標的として、肝細胞癌患者末梢血循環細胞のフローサイトメトリーならびに肝癌組織を用いた免疫組織化学染色での発現を検討し、患者予後との相関解析を行った。肝癌外科切除組織を用いた1細胞トランスクリプトーム解析については単一浮遊細胞液の調整などの条件設定を行った。

癌は癌細胞と、周囲に血管新生や線維化、炎症や免疫抑制などに関係する異常な間質細胞である癌間質細胞からなり、固体により異なる個性的な癌細胞社会を形成していく。この活性化した癌間質細胞には血管新生や免疫チェックポイントなど癌治療における重要な標的分子が発現している。本研究は代表的な難治癌である肝癌に着目し、肝癌において癌間質細胞が癌の悪性形質にどのように寄与するのかを解明し、さらに癌局所から全身の血中に流出する循環癌間質細胞(Circulating Cancer-Associated Stromal Cells : C-CAST)の有無とその特性および肝癌バイオマーカーとしての有用性を明らかにする事を目的とした。本年度は、肝癌患者の循環腫瘍細胞と循環非腫瘍細胞を含むと考えられる末梢血循環細胞を用いた1細胞トランスクリプトーム解析を行うことにより、肝癌患者の予後に寄与する循環血液細胞または細胞集団の同定を試みた。今回、肝癌患者2例の末梢血循環細胞を用いた1細胞トランスクリプトーム解析により細胞集団をクラスタリングし、肝癌患者に共通する特徴的な循環細胞集団を同定した。同定した細胞集団の中の2つの細胞集団に関して特徴的に発現する分子を同定することに成功した。さらに、これらの特徴的に高発現する分子を標的として、肝細胞癌患者末梢血循環細胞のフローサイトメトリーならびに肝癌組織を用いた免疫組織化学染色での発現を検討し、患者予後との相関解析を行った。肝癌外科切除組織を用いた1細胞トランスクリプトーム解析については単一浮遊細胞液の調整などの条件設定を行った。