肝癌化学療法に対する遺伝子治療併用の基礎的研究

肝癌化疗基因治疗组合的基础研究

• 批准号: 18790451
• 负责人: 山下 竜也
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18790451/
• 关键词: アデノウイルスベクター; p53; IL-12; マウス樹状細胞; 肝癌培養細胞; 5-FU

Huh7肝癌培養細胞株を用いたIn vitroの系で,CAGプロモーター下にp53を発現するAxCA.p53を用いてp53の5-FUの抗腫瘍作用の増強効果を検討した.p53を有さないAxCA. nullをコントロールとして,MOI 3,10,30でこれらのアデノウイルス感染させた後,培養上清中に5-FUを12.5μmol/L,50μmol/Lで添加し,48時間後の増殖阻止率を検討した.MOI10では,コントロールに比較して32%の増殖抑制効果の差を示したものの,有意差を認めなかった.またMOI30では,74%の増殖抑制効果の差を認め有意差を示した.このことよりp53発現ウイルスベクターにて5-FUの抗腫瘍作用の増強効果を確認できたものもMOIから検討すると現実的ではなく,さらに発現系などの改善が必要であると考えられた.またCMVプロモーター下にマウスIL-12(mIL-12)を発現する組換え型アデノウイルスAd.mIL-12を用い,Huh7肝癌培養細胞を,ヌードマウスに移植し,In vivoで抗腫瘍効果の検討した.AxCA.nullをコントロールとしてAd.mIL-12の直接投与を検討した.腫瘍周囲の注入場所により,抗腫瘍効果が安定せず,手技の安定に時間がかかった.Ad.mIL-12を用いても抗腫瘍作用の増強はコントロールに比較し,+11±8%であり,コントロールを有意な差を認めなかった.また組織学的には,CD8陽性細胞の集積はみられなかった.このことより,IL-12の効果を得ためには,マウス樹状細胞にIL-12を導入し,それを腫瘍周囲に注入するなどの工夫が必要と判断し,マウス樹状細胞にAd.mIL-12を感染させ,検討中である.

Huh7 liver cancer cell line cultured in in vitro system,CAGプロモーター下にp53を発appearsするAxCA.p53を用いてp53's 5-FU's anti-tumor effect is enhanced by its enhanced effect. p53's さないAxCA. nullをコントロールとして,MOI After 3,10,30でこれらのアデノウイルス was infected with させた, the culture supernatant contained に5-FUを12.5 μmol/L, 50 μmol/L is added, the growth inhibition rate after 48 hours is determined.MOI1 0では,コントロールにComparisonして32%のproliferation-inhibiting effectの differenceをshowしたものの, intentional differenceをidentificationめなかった.またMOI30では, 74% of the growth inhibitory effect is not the same as the difference, the difference is intentional and the difference is shown. このことThe anti-tumor effect of よりp53発成ウイルスベクターにて5-FU has been confirmed to be stronger MOI's から検恙ると见実's ではなく, さらに発前行などの IMPROVEMENT が's necessary であると考えられた.またCMV プロモーター下にマウスIL-12 (mIL-12) を発成する Group replacement type アデノウイルスAd.mIL-12をUsed, Huh7 liver cancer cultured cells を, ヌードマウスにtransplanted し,In The anti-tumor effect of vivo is the same as the injection site around the tumor. The anti-tumor effect is injected directly into the area around the tumor. The effect of swelling is stable, and the manual technique is stable and time-effective. Ad.mIL-12 is used The anti-tumor effect of いてもhas been enhanced by comparison with はコントロールに,+11±8%であり,コンThe collection of CD8-positive cells in the histological examination The effect of IL-12 is good, and the effect of IL-12 is good. The introduction of IL-12 into dendritic cells is necessary, and the time required to inject it into the tumor surrounding the tumor is necessary and the judgment is necessary, and the dendritic cells are infected with Ad.mIL-12, and the infection is in progress.