内皮型NO合成酵素制御および血管内皮機能調整における時計遺伝子DEC1の役割

抑制的時計遺伝子differentiated embryo chondrocyte 1 (Dec1)は、liver kinase B1 (LKB1) のリン酸化を抑制することでadenosine monophosphate-activated protein kinase (AMPK) のリン酸化を抑制することが示唆されている。本研究では、血管内細胞にて、DEC1発現が、LKB1/AMPKを介して、内皮型一酸化窒素合成酵素 （eNOS: endothelial nitric oxide synthase） のリン酸化および、血管内皮機能に及ぼす影響について検討を行っている。6週齢の野生型マウスとDEC1ノックアウトマウスから血管内皮細胞の単離・培養を行い、①大気下野生型マウス内皮細胞、②低酸素下野生型マウス内皮細胞、③大気下DEC1ノックアウトマウス内皮細胞、④低酸素下DEC1ノックアウトマウス内皮細胞において、LKB1、AMPK、eNOSそれぞれのリン酸化/発現について比較検討を行った。②低酸素下野生型マウス内皮細胞にてDEC1の発現が増加することが確認された。③大気下DEC1ノックアウトマウス内皮細胞にてeNOSリン酸化が亢進することが確認された。また、③大気下DEC1ノックアウトマウス内皮細胞にてLKB1リン酸化およびAMPKリン酸化が亢進することが確認された。現在、AMPKリン酸化阻害薬であるcompound Cにて、③大気下DEC1ノックアウトマウス内皮細胞のeNOSリン酸化が抑制されるかどうか確認中である。

抑制的時計遺伝子differentiated embryo chondrocyte 1 (Dec1)は、liver kinase B1 (LKB1) のリン酸化を抑制することでadenosine monophosphate-activated protein kinase (AMPK) のリン酸化を抑制することが示唆されている。本研究では、血管内細胞にて、DEC1発現が、LKB1/AMPKを介して、内皮型一酸化窒素合成酵素 （eNOS: endothelial nitric oxide synthase） のリン酸化および、血管内皮機能に及ぼす影響について検討を行っている。6週齢の野生型マウスとDEC1ノックアウトマウスから血管内皮細胞の単離・培養を行い、①大気下野生型マウス内皮細胞、②低酸素下野生型マウス内皮細胞、③大気下DEC1ノックアウトマウス内皮細胞、④低酸素下DEC1ノックアウトマウス内皮細胞において、LKB1、AMPK、eNOSそれぞれのリン酸化/発現について比較検討を行った。②低酸素下野生型マウス内皮細胞にてDEC1の発現が増加することが確認された。③大気下DEC1ノックアウトマウス内皮細胞にてeNOSリン酸化が亢進することが確認された。また、③大気下DEC1ノックアウトマウス内皮細胞にてLKB1リン酸化およびAMPKリン酸化が亢進することが確認された。現在、AMPKリン酸化阻害薬であるcompound Cにて、③大気下DEC1ノックアウトマウス内皮細胞のeNOSリン酸化が抑制されるかどうか確認中である。