Immunological analysis of the efficacy of SDF-1/CXCR4 inhibitors in idiopathic pulmonary fibrosis

2023年度は当初の研究計画を一部変更し、野生型マウス（C57BL/6系統）での薬剤投与実験より先立ち、ブレオマイシン誘発肺線維症モデルにおいて、ブレオマイシンの経気管投与によって主病変である肺の線維化像が観察できるかどうかを確認した。6から7週齢の雄性Lys-M Cre Cxcr4 flox/floxマウスおよびコントロールとしてCxcr4 flox/floxマウスを用いて、麻酔下にてブレオマイシン 2.5mg/kgを経気管投与し、day 0, 7, 14にて肺を摘出し、病理切片を作製した後、マッソントリクローム染色およびシリウスレッド染色にて、肺組織における線維化像を観察した。肺組織においてはコラーゲンの沈着および架橋形成はcKOマウスにおいてコントロールと比較して軽減している傾向がみられた。線維化の半定量解析は当該年度中に必要匹数を確保できなかったため、次年度に実施することとした。並行して、摘出した肺の一部をホモジナイズし、3-ヒドロキシプロリンの定量解析用サンプルおよび、mRNA抽出用のサンプルを得た。これらのサンプルも次年度に解析する予定である。本年度ではブレオマイシン誘発肺線維症モデルの検証を主に実施したが、ブレオマイシンの毒性が肺の線維化より強く現れていると疑われる個体が認められているため、投与量を1.5または2.0 mg/kgに変更するなどして、モデルの検証を引き続き実施し、系を確立する必要があると考えられた。

2023年度は当初の研究計画を一部変更し、野生型マウス（C57BL/6系統）での薬剤投与実験より先立ち、ブレオマイシン誘発肺線維症モデルにおいて、ブレオマイシンの経気管投与によって主病変である肺の線維化像が観察できるかどうかを確認した。6から7週齢の雄性Lys-M Cre Cxcr4 flox/floxマウスおよびコントロールとしてCxcr4 flox/floxマウスを用いて、麻酔下にてブレオマイシン 2.5mg/kgを経気管投与し、day 0, 7, 14にて肺を摘出し、病理切片を作製した後、マッソントリクローム染色およびシリウスレッド染色にて、肺組織における線維化像を観察した。肺組織においてはコラーゲンの沈着および架橋形成はcKOマウスにおいてコントロールと比較して軽減している傾向がみられた。線維化の半定量解析は当該年度中に必要匹数を確保できなかったため、次年度に実施することとした。並行して、摘出した肺の一部をホモジナイズし、3-ヒドロキシプロリンの定量解析用サンプルおよび、mRNA抽出用のサンプルを得た。これらのサンプルも次年度に解析する予定である。本年度ではブレオマイシン誘発肺線維症モデルの検証を主に実施したが、ブレオマイシンの毒性が肺の線維化より強く現れていると疑われる個体が認められているため、投与量を1.5または2.0 mg/kgに変更するなどして、モデルの検証を引き続き実施し、系を確立する必要があると考えられた。