CMTM family proteins regulate PD-L1 exosome secretion and anti-tumor immunity

免疫チェックポイント阻害剤(ICI)の登場によって非小細胞肺癌（NSCLC）の治療成績が飛躍的に改善している。ニボルマブ等の投与により劇的な治療効果を示す症例もあるが、奏効率は20％程度に留まる。一方、EGFRチロシンキナーゼ阻害剤はNSCLCに対する優れた治療薬であるが、耐性が課題である。最近になって、4回膜貫通分子CMTM6が免疫チェックポイントPD-L1の発現を制御することが明らかになった。申請者は肺癌由来エクソソームがCMTM7に制御される知見を得た。本研究では、「CMTM6およびCMTM7がエクソソーム形成を通して治療抵抗性を誘導している」という仮説を立て、その検証を行う。我々は肺癌細胞株のCMTMの発現を他癌腫細胞株を比較しながら評価した結果、肺癌細胞株ではCMTM6およびCMTM7で発現が高いことが分かった。その後の研究をCMTM6とCMTM7にフォーカスしていくことになった。H1975肺癌細胞株とii-18肺癌細胞株にCMTM6およぶCMTM7をトランスフェクトし安定的にCMTMを発現できる細胞株を樹立した。それぞれのCMTMの働きをみるためにshRNAコンストラクトを作成を試みている。また、CMTM,EGFR、PD-L1の追跡を容易にするためNanoLuc 標識ベクターの作成にも取り組んでいる。これらのベクター細胞の樹立によりin vitroで効率的にCMTMの働きによる変化をみることができるようになる。超遠心を用いてエクソソームの検出についても検証中である。

免疫チェックポイント阻害剤(ICI)の登場によって非小細胞肺癌（NSCLC）の治療成績が飛躍的に改善している。ニボルマブ等の投与により劇的な治療効果を示す症例もあるが、奏効率は20％程度に留まる。一方、EGFRチロシンキナーゼ阻害剤はNSCLCに対する優れた治療薬であるが、耐性が課題である。最近になって、4回膜貫通分子CMTM6が免疫チェックポイントPD-L1の発現を制御することが明らかになった。申請者は肺癌由来エクソソームがCMTM7に制御される知見を得た。本研究では、「CMTM6およびCMTM7がエクソソーム形成を通して治療抵抗性を誘導している」という仮説を立て、その検証を行う。我々は肺癌細胞株のCMTMの発現を他癌腫細胞株を比較しながら評価した結果、肺癌細胞株ではCMTM6およびCMTM7で発現が高いことが分かった。その後の研究をCMTM6とCMTM7にフォーカスしていくことになった。H1975肺癌細胞株とii-18肺癌細胞株にCMTM6およぶCMTM7をトランスフェクトし安定的にCMTMを発現できる細胞株を樹立した。それぞれのCMTMの働きをみるためにshRNAコンストラクトを作成を試みている。また、CMTM,EGFR、PD-L1の追跡を容易にするためNanoLuc 標識ベクターの作成にも取り組んでいる。これらのベクター細胞の樹立によりin vitroで効率的にCMTMの働きによる変化をみることができるようになる。超遠心を用いてエクソソームの検出についても検証中である。