汎発性膿疱性乾癬続発性有棘細胞癌に共通な新規IL36RN遺伝子変異の役割の解明

若年発症の汎発性膿疱性乾癬（GPP）に有棘細胞癌（SCC）を続発した複数の症例において、SCCの皮膚生検組織から抽出したゲノムでのIL36RN遺伝子変異を検討したところ、共通して既報告の疾患関連変異（ファースト変異）と新規の変異（セカンド変異）がダブルでホモに存在し、モザイクが示唆される症例もあることを見出した事実（未報告）に基づき、本研究では「IL36RN 遺伝子の先天性の機能喪失型変異によってGPP を発症し、さらに、継続する炎症に関連して局所で一部の表皮角化細胞に後天的に2 つ目の変異が入ったことによってその機能が変化し、あるいは何らかの機能が追加され、癌化に至った」との仮説について、その検証を行うことを目的とする。本年は、まず山口大学下村裕教授との共同研究により、IL36RN遺伝子にGPP 関連ファースト変異と新規セカンド変異の一方のみあるいは双方を挿入したcDNA を用意し、塩基配列を確認した。また、和歌山県立医科大学改正恒康教授との共同研究により、マウスにおいても保存されているIL36RN 遺伝子のGPP関連ファースト変異と新規セカンド変異の一方あるいは双方を含むガイドRNAと、変異を導入するためのオリゴDNAを作成し、CRISPR/Cas9システムを用いてマウス受精卵の遺伝子改変を行い、ヘテロノックインマウスを樹立した。SPF化のため兵庫医科大学に卵から導入してマウス化し、現在繁殖中である。

若年発症の汎発性膿疱性乾癬（GPP）に有棘細胞癌（SCC）を続発した複数の症例において、SCCの皮膚生検組織から抽出したゲノムでのIL36RN遺伝子変異を検討したところ、共通して既報告の疾患関連変異（ファースト変異）と新規の変異（セカンド変異）がダブルでホモに存在し、モザイクが示唆される症例もあることを見出した事実（未報告）に基づき、本研究では「IL36RN 遺伝子の先天性の機能喪失型変異によってGPP を発症し、さらに、継続する炎症に関連して局所で一部の表皮角化細胞に後天的に2 つ目の変異が入ったことによってその機能が変化し、あるいは何らかの機能が追加され、癌化に至った」との仮説について、その検証を行うことを目的とする。本年は、まず山口大学下村裕教授との共同研究により、IL36RN遺伝子にGPP 関連ファースト変異と新規セカンド変異の一方のみあるいは双方を挿入したcDNA を用意し、塩基配列を確認した。また、和歌山県立医科大学改正恒康教授との共同研究により、マウスにおいても保存されているIL36RN 遺伝子のGPP関連ファースト変異と新規セカンド変異の一方あるいは双方を含むガイドRNAと、変異を導入するためのオリゴDNAを作成し、CRISPR/Cas9システムを用いてマウス受精卵の遺伝子改変を行い、ヘテロノックインマウスを樹立した。SPF化のため兵庫医科大学に卵から導入してマウス化し、現在繁殖中である。