自己免疫疾患の病変部位における自己抗体の産生機構の解明

阐明自身免疫性疾病病变部位自身抗体的产生机制

• 批准号: 22K08528
• 负责人: 竹下 勝
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08528/
• 关键词: 抗ARS抗体症候群; シェーグレン症候群; 自己抗体; 肺胞洗浄液; 唾液腺; 自己免疫疾患; B細胞

本研究は2疾患を対象にして自己抗体が出現する機構の解明を目指すものである。1つは抗Jo-1抗体、抗PL-7抗体などの別々の自己抗体が出現する一方、共通の筋/肺/皮膚症状を呈する抗ARS抗体症候群であり、もう1つは抗SSA抗体と抗セントロメア抗体という背景病態が異なる2系統の自己抗体が出現するシェーグレン症候群である。本年度の進捗は以下の通り。抗ARS抗体症候群においては、肺胞洗浄液検体6例と、偶然入手した唾液腺生検検体2例を収集し解析した。両者とも病変部位に浸潤した形質細胞をシングルセルソートし、各細胞の抗体の可変領域をシークエンスし、発現ベクターに組み込むことで、病変部位で作られていた抗体を実験室で再現した。計200種類以上の抗体を作製し、その反応性を調べ、抗Jo-1抗体、抗EJ抗体、抗Ro52抗体等の自己抗体が相当の割合で含まれている事を確認した。更にそれらの抗体のエピトープの解析、体細胞超変異数の解析を進め、論文化を進めている。また、少数例ながら筋生検検体の収集も進めている。シェーグレン症候群については、唾液腺生検検体を20例以上を収集し、組織を細切、コラゲナーゼ処理を行い、リンパ球と唾液腺上皮細胞をセルソートし、chromium controllerによるシングルセル解析を実施した。同疾患内で抗SSA抗体と抗セントロメア抗体という異なる自己抗体を持つ2群が存在することを考慮し、それぞれの抗体を持つ症例、両方を持つ症例、比較対象としての非シェーグレン症候群症例を一定数含めて収集した。引き続き解析を進めていく。

这项研究旨在阐明自身抗体出现在两种疾病中的机制。一种是抗ARS综合征，其中出现了单独的自身抗体（例如抗JO-1和抗PL-7抗体），而其他具有常见肌肉/肺/皮肤症状的礼物则出现，另一种是Sjogren综合征，其中出现了两种不同的自身抗体，出现抗SSA和抗中性抗体抗体。今年的进展如下：在抗ARS抗体综合征中，收集并分析了六例肺泡灌洗液样品和两例意外唾液腺活检样品。在这两种情况下，都将渗透病变位点的浆细胞分类为单细胞，并且对每个细胞的抗体的可变区域进行了测序，并将其掺入表达载体中，以重现实验室病变位点产生的抗体。总共产生了200多种类型的抗体，并检查了反应性，并确认包括抗-JO-1抗体，抗EJ抗体和抗RO52抗体等自身抗体相当一部分。此外，我们正在分析这些抗体的表位，并分析体细胞高温的数量，并促进讨论的培养。此外，尽管少数病例，我们也正在收集肌肉活检。对于Sjogren综合征，收集了20例唾液腺活检标本，切碎组织，治疗胶原酶，淋巴细胞，淋巴细胞和唾液腺上皮细胞进行细胞进行分类，并使用铬控制器进行单细胞分析。考虑到同一疾病中有两组具有不同自身抗体的组，抗SSA和抗中心抗体，我们收集了每种抗体，具有既有综合症的病例的病例，均为比较。我们将继续进行分析。