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Influence of HTLV-1 for autoantibody production system and Th subset

HTLV-1对自身抗体产生系统和Th亚群的影响

基本信息

批准号：
22K08552
负责人：
中村英樹
金额：
$ 2.5万
依托单位：
Nihon University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08552/
关键词：
シェーグレン症候群 HTLV-1 B細胞

项目摘要

シェーグレン症候群患者末梢血による免疫グロブリンIgGおよび抗Ro/SS-A抗体産生へのHTLV-1感染の影響を観察するため、フィーダー細胞を用いたin vitro抗体産生系作成を行った。CD40リガンドを発現したフィーダー細胞とIL2、IL-10等のサイトカイン刺激の下、シェーグレン症候群患者末梢血より分離したB細胞を培養した。コントロールとして健常人より同様に末梢血B細胞を分離した。培養day8までのIgG産生を見ると、シェーグレン症候群患者および健常人ともに経時的なIgG産生増加が確認できた。さらに、健常人からの特異的自己抗体産生を見るためにこの系を用いてB細胞からの抗サイトメガロIgG産生を確認した。現在、シェーグレン症候群患者末梢血B細胞からの抗Ro60/SS-A抗体産生を確認中である。一方で、これらのB細胞と共培養するHTLV-1陰性およびHTLV-1陽性T細胞株の調整を行っている。共培養に使用するため、T細胞株に放射線照射を行い増殖を抑制できる最良の放射線照射量を検討中である。現在までシェーグレン症候群患者および健常人由来のB細胞とT細胞株の共培養を進めており、HTLV-1非感染T細胞株JurkatおよびMOLT-4との共培養では、IgG産生は殆ど抑制しない結果が得られている。一方で、HTLV-1陽性細胞株を使用した場合には、IgG産生が抑制される傾向が確認された。これらに並行して、抗HTLV-1抗体陽性および陰性シェーグレン症候群患者唾液腺浸潤各級におけるヘルパーT細胞サブセットの免疫染色解析を進めている。陽性コントロールヒト組織の準備と、染色に使用する一次抗体選定を進めている。

The effect of HTLV-1 infection on IgG and anti-Ro/SS-A antibody production in peripheral blood of patients with chronic hepatitis B was investigated. CD40 is detected in peripheral blood cells and IL-2 and IL-10 are isolated from peripheral blood cells of patients with schizophrenia. The separation of B cells from peripheral blood is the same for healthy people. Increased IgG production was confirmed in both healthy and non-infected individuals on day8 of culture. The production of specific antibodies in healthy individuals was confirmed by the use of B cells. The production of anti-Ro 60/SS-A antibodies by B cells in peripheral blood of patients with SCRS is now being confirmed. The adjustment of HTLV-1 negative and HTLV-1 positive T cell lines in co-culture of T cells and B cells was carried out. The best amount of radiation exposure to inhibit the proliferation of T cell lines using in co-culture is under discussion. Co-culture of HTLV-1 non-infected T cell lines Jurkat and MOLT-4 from patients with HRS and healthy individuals has been successfully performed. In one case, HTLV-1 positive cell lines were used, but the tendency to inhibit IgG production was confirmed. In addition, anti-HTLV-1 antibodies were positive and negative in patients with salivary gland infiltration at all levels, and T cell immunostaining analysis was performed. Preparation and staining of positive cells using primary antibody selection