Influence of HTLV-1 for autoantibody production system and Th subset

HTLV-1对自身抗体产生系统和Th亚群的影响

基本信息

批准号：
22K08552
负责人：
中村英樹
金额：
$ 2.5万
依托单位：
Nihon University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08552/
关键词：
シェーグレン症候群 HTLV-1 B細胞

项目摘要

シェーグレン症候群患者末梢血による免疫グロブリンIgGおよび抗Ro/SS-A抗体産生へのHTLV-1感染の影響を観察するため、フィーダー細胞を用いたin vitro抗体産生系作成を行った。CD40リガンドを発現したフィーダー細胞とIL2、IL-10等のサイトカイン刺激の下、シェーグレン症候群患者末梢血より分離したB細胞を培養した。コントロールとして健常人より同様に末梢血B細胞を分離した。培養day8までのIgG産生を見ると、シェーグレン症候群患者および健常人ともに経時的なIgG産生増加が確認できた。さらに、健常人からの特異的自己抗体産生を見るためにこの系を用いてB細胞からの抗サイトメガロIgG産生を確認した。現在、シェーグレン症候群患者末梢血B細胞からの抗Ro60/SS-A抗体産生を確認中である。一方で、これらのB細胞と共培養するHTLV-1陰性およびHTLV-1陽性T細胞株の調整を行っている。共培養に使用するため、T細胞株に放射線照射を行い増殖を抑制できる最良の放射線照射量を検討中である。現在までシェーグレン症候群患者および健常人由来のB細胞とT細胞株の共培養を進めており、HTLV-1非感染T細胞株JurkatおよびMOLT-4との共培養では、IgG産生は殆ど抑制しない結果が得られている。一方で、HTLV-1陽性細胞株を使用した場合には、IgG産生が抑制される傾向が確認された。これらに並行して、抗HTLV-1抗体陽性および陰性シェーグレン症候群患者唾液腺浸潤各級におけるヘルパーT細胞サブセットの免疫染色解析を進めている。陽性コントロールヒト組織の準備と、染色に使用する一次抗体選定を進めている。

为了观察HTLV-1感染对Sjogren综合征患者外周血产生免疫球蛋白IgG和抗RO/SS-A抗体的影响，使用进给细胞创建了体外抗体生产系统。在诸如IL2和IL-10等细胞因子刺激下培养了从Sjogren综合征患者外周血中分离出的B细胞。从健康个体作为对照中分离出外周血B细胞。从培养第8天进行IgG产生，患有Sjogren综合征和健康个体的患者均随着时间的流逝而增加了IgG的产生。此外，该系统被用来确认B细胞中的抗胞外瘤生产，以查看来自健康个体的特定自身抗体。目前，正在确认来自Sjogren综合征患者外周血B细胞产生的抗RO60/SS-A抗体。另一方面，调整了与这些B细胞共培养的HTLV-1阴性和HTLV-1阳性T细胞系。为了用于共培养，我们目前正在研究最佳的辐射剂量，该辐射可以通过辐射来照射T细胞系来抑制增殖。迄今为止，我们一直在共培养B细胞和来自Sjogren综合征和健康个体患者的B细胞和T细胞系，以及HTLV-1未感染的T细胞系Jurkat和Molt-4的共培养物几乎没有抑制IgG的产生。另一方面，当使用HTLV-1阳性细胞系时，确认了抑制IgG产生的趋势。与这些同行，正在进行抗HTLV-1抗体阳性和阴性Sjogren综合征的患者的各种水平浸润唾液腺中辅助T细胞的免疫染色分析。我们目前正在准备阳性对照的人体组织，并选择用于染色的初级抗体。