脳死関連肺障害の病態解明と予防・治療法の開発ーNPY,VEGFと腸換気法の検討

阐明脑死亡相关肺部疾病的病理学并制定预防和治疗方法——NPY、VEGF和肠道通气方法的检查

• 批准号: 22K09045
• 负责人: 西脇 公俊
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K09045/
• 关键词: 神経原性肺水腫; 神経ペプチドY; 細胞透過性; ラット脳死モデル; 腸換気法; 脳死モデル; ＮＰＹ; ＶＥＧＦ

我々は、神経原性肺水腫の発生において、肺交感神経終末にカテコールアミンと共存する神経ペプチドY（NPY）による神経性調節が細胞透過性に関与すること、および肺（気管支粘膜、平滑筋、肺胞毛細血管内皮細胞）における血管内皮細胞増殖因子（vascular endothelial growth factor: VEGF）の発現が肺血管透過性亢進に深く関与していることを明らかにしてきた。本研究の目的は、in vitro肺細胞透過性評価系とげっ歯類を用いたin vivo脳死誘発肺水腫モデル系を確立し、NPYやVEGFの作用機序を明らかにすることである。また、脳死患者の肺障害の予防・治療法の一つとして、「腸換気法」による肺保護効果についても検討する。本年度は、ラットから単離した肺胞上皮細胞を使用するin vitro肺細胞透過性評価系とin vivo脳死誘発肺水腫モデルの構築及び「腸換気法」の有用性の検討を試みた。In vitro肺細胞透過性評価系には、ラットから単離した2型肺胞上皮細胞を1型肺胞上皮細胞に分化した初代細胞を用いることにした。しかしながら、2型肺胞上皮細胞の選択的回収がうまくできなかった。そのため、単離後の細胞分化、使用する培地、最適な細胞播種密度、細胞培養期間などについても検討できなかった。In vivo脳死誘発肺水腫モデルは、ラット頭蓋内にバルーンカテーテルを挿入し、バルーン内に生理食塩水を注入することにより頭蓋内圧を上昇させ、脳幹部にヘルニアを起こすことにより作製した。同モデルからの気管支肺胞洗浄液（Bronchoalveolar lavage fluid: BALF）採取法を確立し、サンプル中の総蛋白を含む生化学的検査法を検討中である。

I 々 は, god 経 pulmonary oedema の 発 raw に お い て, lung sympathetic god 経 terminal に カ テ コ ー ル ア ミ ン と coexistence す る god 経 ペ プ チ ド Y (NPY) に よ る god 経 sex adjust が cell permeability に masato and す る こ と, お よ び lung (気 tube mucosa, smooth muscle, pulmonary capillary endothelial cells) に お け る endothelial cells raised colonization factor (vascu Lar endothelial growth factor: VEGF) の 発 now が pulmonary vascular permeability hyperfunction に deep く masato and し て い る こ と を Ming ら か に し て き た. は の purpose this study, in vitro lung cell permeability evaluation 価 department と げ っ 歯 class を with い た in vivo 脳 death induced 発 pulmonary edema モ デ ル を established し, NPY や VEGF の function machine sequence を Ming ら か に す る こ と で あ る. ま た, の 脳 death patients pulmonary handicap of の to prevention, treatment の a つ と し て, "im in 気 method" に よ る lung protection services fruit に つ い て も beg す 検 る. This year は, ラ ッ ト か ら 単 from し を た cell lung epithelial cells using す る lung cells in vitro と 価 department through the use of sexual assessment in vivo 脳 death induced 発 pulmonary edema モ デ ル の constructs and び "im in 気 method" の usefulness の 検 please try を み た. The In vitro permeability evaluation 価 lung cells is に は, ラ ッ ト か ら 単 from し た type 2 cell lung epithelial cells を lung epithelial cells に し cell type 1 た original cells を using い る こ と に し た. The reproduction of <s:1> な ながら, type 2 lung cell epithelial cells <s:1> selected 択 がうまくで な な った った. そ の た め, 単 の cell differentiation, use after す る petty, optimal な cell seeding density, cell culture during な ど に つ い て も beg で 検 き な か っ た. The In vivo 脳 death induced 発 pulmonary edema モ デ ル は, ラ ッ ト within cranium に バ ル ー ン カ テ ー テ ル を scions into し, バ ル ー ン を に physiological food salt water In the injection す る こ と に よ り within cranium 圧 を rise さ せ, 脳 cadres に ヘ ル ニ ア を up こ す こ と に よ り cropping し た. With モ デ ル か ら の 気 tube incorporated the lung cell liquid (Bronchoalveolar lavage fluid, BALF) take を established し, サ ン プ ル in の 総 protein contains を む 検 check method of biochemistry を 検 beg in で あ る.