カニクイザルのSARS-Cov-2感染モデルを利用した嗅覚障害発症機序の解明
カニクイザルのSARS-Cov-2感染モデルを利用した嗅覚障害発症機序の解明
批准号:
22K09704
负责人:
清水 志乃
金额:
$2.66万
依托单位国家:
日本
项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份:
2022
资助国家:
日本
项目状态:
未结题
起止时间:
2022-04-01 至 2025-03-31
中文摘要
COVID-19で生じる嗅覚障害のメカニズムはいまだに十分解明されていない。SARS-CoV-2に対するワクチンや治療法開発のために感染モデルとして利用された非ヒト霊長類のカニクイザルあるいはアカゲザルの剖検組織を嗅覚障害の発症機序解明を目的に観察した。嗅裂を含む鼻腔全体を観察するために頭部組織を固定後、脱灰液に浸しながらトリミングを行った。まずヒトとの解剖学的な差を観察した。ヒトの嗅球は前頭蓋底の篩板に全体が横たわる状態で存在するが、カニクイザルの前頭蓋底の前方には嗅球が嵌入するくぼみが存在し嗅球はそのくぼみに陥頓する状態で存在した。くぼみの尾側に篩板が存在した。篩板を含む鼻腔全体を観察するために、前頭蓋底から上顎の組織全体を脱灰しメス刃でトリミングした。EDTA処方の脱灰液を交換しながら6-8週間に浸した。鼻甲介の構造はヒトと共通しており、ethmoturbinateとmaxilloturbinateの二つの鼻甲介が存在し、一部の個体では第三の鼻甲介も存在した。副鼻腔は両側の上顎洞のみで前頭洞や篩骨洞は存在しなかった。両側の嗅裂を含む前頭蓋底から鼻腔底までの前額断切片を作成した。非感染個体として、人道的安楽死に至った2個体の組織も同様の方法で処理し保存した。HE染色で両側の嗅上皮が切片に含まれることを形態学的に確認した。固定・脱灰・トリミング・包埋・薄切方法を定めて、組織の収集を行った。検討に用いた感染モデルの多くはデルタ株、武漢株に感染したモデルであった。予備検討としてSARS-CoV-2 N蛋白に対する免疫染色を行い、鼻腔の呼吸上皮・嗅上皮に感染細胞が存在することを確認した。
英文摘要
COVID-19で生じる嗅覚障害のメカニズムはいまだに十分解明されていない。SARS-CoV-2に対するワクチンや治療法開発のために感染モデルとして利用された非ヒト霊長類のカニクイザルあるいはアカゲザルの剖検組織を嗅覚障害の発症機序解明を目的に観察した。嗅裂を含む鼻腔全体を観察するために頭部組織を固定後、脱灰液に浸しながらトリミングを行った。まずヒトとの解剖学的な差を観察した。ヒトの嗅球は前頭蓋底の篩板に全体が横たわる状態で存在するが、カニクイザルの前頭蓋底の前方には嗅球が嵌入するくぼみが存在し嗅球はそのくぼみに陥頓する状態で存在した。くぼみの尾側に篩板が存在した。篩板を含む鼻腔全体を観察するために、前頭蓋底から上顎の組織全体を脱灰しメス刃でトリミングした。EDTA処方の脱灰液を交換しながら6-8週間に浸した。鼻甲介の構造はヒトと共通しており、ethmoturbinateとmaxilloturbinateの二つの鼻甲介が存在し、一部の個体では第三の鼻甲介も存在した。副鼻腔は両側の上顎洞のみで前頭洞や篩骨洞は存在しなかった。両側の嗅裂を含む前頭蓋底から鼻腔底までの前額断切片を作成した。非感染個体として、人道的安楽死に至った2個体の組織も同様の方法で処理し保存した。HE染色で両側の嗅上皮が切片に含まれることを形態学的に確認した。固定・脱灰・トリミング・包埋・薄切方法を定めて、組織の収集を行った。検討に用いた感染モデルの多くはデルタ株、武漢株に感染したモデルであった。予備検討としてSARS-CoV-2 N蛋白に対する免疫染色を行い、鼻腔の呼吸上皮・嗅上皮に感染細胞が存在することを確認した。
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会议论文
SARS-CoV-2感染非ヒト霊長類の鼻腔組織の観察
感染 SARS-CoV-2 的非人灵长类动物鼻组织的观察
DOI:
--
发表时间:
2022
期刊:
影响因子:
--
作者:
[清水志乃, 仲山美沙子, 石垣宏仁, Nguyen Thanh Cong, 北川善紀, 伊藤 靖, 清水猛史]
通讯作者:
清水猛史
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