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Is CD109 useful as a biomarker or therapeutic target for head and neck cancer?

CD109 可用作头颈癌的生物标志物或治疗靶点吗？

基本信息

批准号：
22K09749
负责人：
山下拓
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Kitasato University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K09749/
关键词：
CD109 REV7 ノックアウト癌細胞雄株バイオマーカー頭頸部癌

项目摘要

中咽頭扁平上皮癌患者の摘出ないし生検の臨床検体を用いてp16免疫染色およびCD109免疫染色を行った。その結果、p16陽性中咽頭扁平上皮癌においてCD109陽性群はCD109陰性群と比較して無増悪生存率が有意に不良であることを確認した（p < 0.01）。またヒトp16陽性中咽頭癌細胞株においてCD109の強発現が認められることをWestern Blotで確認後、siRNAにてCD109発現をノックダウンしたところ、CD109ノックダウンp16陽性中咽頭癌細胞株では野生株に比較しインベージョンアッセイにおける腫瘍浸潤能の低下がみられた。p16陰性頭頸部扁平上皮癌細胞株であるHSC-3およびFaDu、p16陽性頭頸部扁平上皮癌であるUM-SCC-47およびUM-SCC-104を用い、シスプラチン感受性の検討に適切な細胞播種濃度およびシスプラチン濃度の条件を検討した。この条件検討はCD109ノックアウトによるシスプラチンに対する感受性の変化を今後検討するために必要である。また、上記の4種類の細胞株を用い、CRISPR-Cas9システムによる遺伝子導入、遺伝子導入に必要なプラスミド精製、遺伝子導入した細胞のセレクション、遺伝子導入した細胞のノックアウト効果検証に必要な条件検討および手技取得をそれぞれ行っている。現時点ではFaDuに対してリポフェクタミン試薬を用いたプラスミド法によるREV7のノックアウトとピューロマイシン耐性遺伝子導入を利用したセレクションの条件検討が達成できている。CD109のノックアウトの条件検討も並行して進めている。REV7のノックアウトに用いるプラスミドを精製するための大腸菌ノックアウトベクターは当大学の病理学教室が所有しているものを使用しているが、ノックアウトベクター作成および精製したプラスミドのシーケンス確認に関する手技は並行して取得中である。

In patients with flat epithelial carcinoma of the middle pharynx, the body was extracted and used for p16 immunostaining and CD109 immunostaining. The results showed that p16 squamous cell carcinoma of middle pharynx and pharynx flat epithelioma had a higher survival rate of CD109 than that of CD109 (p & lt; 0.01). The cell line of pharynx cancer in the middle pharynx showed that the cell line of middle pharynx cancer was infected by CD109, the cell line of pharynx cancer was confirmed by Western Blot, the cell line of pharynx cancer was confirmed by CD109, and the cell line of middle pharynx cancer was detected by CD109 and p16. The cell lines of p16 parenchyma flat epithelial carcinoma, the HSC-3 cell line, the FaDu cell line, the p16 trophoblastic carcinoma cell line, the UM-SCC-47 cell line, the UM-SCC-104 cell line, the cell seeding strain, the cell density, the temperature, the temperature, the Condition, CD109, sensitivity, sensitivity, The use of cell lines in the following categories: the use of the cell line, the CRISPR-Cas9 cell line, the cell, the cell and the cell. At some point in time, the FaDu monitoring system was used to determine whether the REV7 tolerance test was successful. This is the best way to make use of the monitoring conditions. CD109 is responsible for the improvement of the conditions and the progress of the program. REV7