歯根膜コラーゲンのプロテオスタシス制御に基づく新規歯周治療法の開発

基于牙周膜胶原蛋白稳态控制的牙周治疗新方法的开发

• 批准号: 22K09979
• 负责人: 中村 友美
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K09979/
• 关键词: プロテオスタシス; コラーゲン; フォールディング; オートファジー; 歯周病

歯根膜は細胞外基質タンパクを大量に産生しており、とりわけコラーゲンの生合成が活発な組織である。細胞内のタンパク恒常性を維持するためには、その合成と分解のみならず、立体構造の安定化（フォールディング）による量や質の管理が不可欠である。加齢により環境ストレスが蓄積した歯根膜では、分解系のひとつであるオートファジーやフォールディングの異常が推察されるが、その詳細は不明である。本研究では、コラーゲン特異的なシャペロン分子（HSP47）に着目し、加齢が歯根膜細胞のコラーゲンタンパクのプロテオスタシスに及ぼす影響を検討した。申請者はこれまでの研究により、歯根膜におけるオートファジーの異常がコラーゲン代謝に影響を及ぼし、硬組織形成に関係することを報告している。本研究において、2022年度は、ヒト歯根膜細胞のHSPsならびにHSP47活性が成熟コラーゲンの産生と変性コラーゲンの蓄積に及ぼす影響を、各種のHSPsの誘導剤あるいは阻害剤、HSP47のsiRNAを用いて検討した。HSPs活性がヒト歯根膜細胞の成熟コラーゲンの産生に及ぼす影響を検討するために、ELISA法を用いた解析を行った。また、HSPs活性の低下がヒト歯根膜細胞のコラーゲン代謝に及ぼす影響を検討するために、蛍光プローブCollagen Hybridizing Peptide(CHP)を用いて変性コラーゲンを標識し、共焦点顕微鏡観察で評価した。

歯 root membrane は extracellular matrix タ ン パ ク を a lot に し て お り, と り わ け コ ラ ー ゲ ン の biosynthesis が live 発 な organization で あ る. Intracellular の タ ン パ ク constancy を maintain す る た め に は, そ の synthetic と decomposition の み な ら ず, three-dimensional structure の stabilization (フ ォ ー ル デ ィ ン グ) に よ る quantity が や の quality management do not owe で あ る. Add 齢 に よ り environment ス ト レ ス が accumulation し た 歯 root membrane で は, decomposition is の ひ と つ で あ る オ ー ト フ ァ ジ ー や フ ォ ー ル デ ィ ン グ の abnormal が push examine さ れ る が, そ の detailed は unknown で あ る. This study で は, コ ラ ー ゲ ン specific な シ ャ ペ ロ ン molecules (HSP47) に し, plus 齢 が 歯 root membrane cells の コ ラ ー ゲ ン タ ン パ ク の プ ロ テ オ ス タ シ ス に and ぼ す influence を beg し 検 た. Applicants は こ れ ま で の research に よ り, 歯 root membrane に お け る オ ー ト フ ァ ジ ー の abnormal が コ ラ ー ゲ ン metabolic に を and ぼ し, hard tissue に masato is す る こ と を report し て い る. This study に お い て, 2022 annual は, ヒ ト 歯 root membrane cells の HSPs な ら び に HSP47 active が mature コ ラ ー ゲ ン の produce と - sex コ ラ ー ゲ ン の accumulation に and ぼ す influence を, various の HSPs の induced tonic あ る い は resistance against tonic, HSP47 の siRNA を with い て beg し 検 た. HSPs active が ヒ ト 歯 root membrane cells の mature コ ラ ー ゲ ン の に and ぼ す influence を beg す 検 る た め を に, ELISA method with い た parsing line を っ た. ま た, HSPs active low の が ヒ ト 歯 root membrane cells の コ ラ ー ゲ に ン metabolism and ぼ す influence を beg す 検 る た め に 蛍 light プ ロ ー ブ Collagen Hybridizing Peptide (CHP) を い て - sex コ ラ ー ゲ ン を logo し, total focus 顕 micromirror 観 examine で review 価 し た.