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Explore the effects of laser in vital pulp therapy using epigenetics analysis

利用表观遗传学分析探讨激光在活髓治疗中的作用

基本信息

批准号：
22K10020
负责人：
横瀬敏志
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Meikai University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

これまでに、10週齢のメスSDラットの下顎切歯から酵素法で分離した歯髄培養細胞を用いて、半導体レーザー（波長808nm)を0.5W, 120J, エネルギー密度15J/cm2で照射し、その後の歯髄培養細胞に対してDspp,BGgp Alp,のmRNA遺伝子発現に対する影響を調べた。培養開始後、３週間後に細胞からtotal RNAを抽出し、Real time PCRにて分析したとろころ、レーザー照射によって全ての遺伝子発現が非照射群に比較して有意に亢進することが確認された。さらに、象牙質形成の指標になる、石灰化結節の形成が同様に亢進したことにより、レーザー照射によって象牙芽細胞への分化が亢進することを確認できた。さらにこの亢進のメカニズムを調べる為に、Wnt10a, Lef-1とOxytocin receptorの関係を調べた。レーザー照射によってOxytocin receptorとWnt10aの遺伝子発現が亢進することが見出された。これはレーザー照射によって細胞分化に重要なウイントシグナルのカノニカル経路が刺激されたことを示している。さらにこれらのレーザー照射された歯髄培養細胞のDNAのメチル化をELISAで調べたところ、非照射群の歯髄培養細胞に比較してDNAのメチル化が有意に５０％増加していることが明らかとなった。この結果はレーザー照射によって象牙芽細胞への分化の亢進と象牙質形成に関連する遺伝子の発現が誘導されていることを示しており、さらにこの遺伝子発現の調整にDNAのメチル化すなわちエピジェネティクスが関連する可能性が明らかとなった。

The culture cells were isolated by the method of enzyme digestion under the temperature of 10 ℃ and 10 ℃. The cells were irradiated with 808nm (wavelength 808nm) 0.5W, 120J, and the density of the cells was irradiated with 15J/cm2. After that, the cells were incubated with Dspp,BGgp Alp, and the effect of mRNA was observed. After the start of incubation and 3 years later, total RNA extraction was performed, Real time PCR analysis was performed, and radiation exposure was performed. The results showed that the non-irradiated group had the intention to increase the concentration of total radiation. The formation of ivory and ivory, the formation of calcinations, the formation of calcification, the formation of calcium, the formation of ivory, ivory and ivory. Wnt10a, Lef-1, Oxytocin receptor, hyperactivity, hyperactivity, hypertension. There is a sign of hyperactivity in the Oxytocin receptor Wnt10a after exposure. Irradiation is important for cell differentiation. It is important to stimulate the pathway. The cells were exposed to DNA, the cells were cultured, the ELISA cells were cultured, the cells were cultured in non-irradiated groups, the cells were cultured in DNA cells, and the cells were not irradiated. Results the results showed that the differentiation of ivory germ cells increased in the presence of radiation. The formation of ivory germ cells showed that there was a significant difference in the possibility of the formation of ivory germ cells.