ケミカルジェネティクスを応用したインプラント周囲軟組織発現遺伝子の機能解析と創薬

使用化学遗传学对种植体周围软组织中表达的基因进行功能分析和药物发现

基本信息

批准号：
22K10023
负责人：
佐々木穂高
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Tokyo Dental College
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

現在、超高齢社会をむかえた我が国では、歯科インプラント治療が広く普及されてきた一方で、在宅患者におけるインプラントの感染によって生じるインプラント周囲炎の増加が危惧されている。本研究では、感染の起点となるインプラント周囲軟組織で特異的発現変化する遺伝子（PITS遺伝子）を調節することがインプラント周囲炎予防の鍵となると考え、多くの化合物の効果を同時に評価するハイスループットスクリーニング法を応用し、化合物を応用した遺伝子の機能を評価するケミカルジェネティクスを応用して、インプラント周囲炎予防薬を開発することを目的としている。初年度では、「インプラント周囲組織特異的遺伝子（PITS遺伝子）の発現を調整する化合物同定」を行うことを目的とした。4～８週齢のＳＤ系ラット（雄性）の口腔粘膜結合組織からExplant法を用いて初代線維芽細胞培養を確立し、128０種の化合物を含む薬物ライブラリーを用いたハイスループットスクリーニング法（HTS法）を行なった。特定遺伝子の機能抑制を評価するうえで、化合物による細胞毒性、不適正な濃度などによって細胞死が生じる影響が、PITS遺伝子の発現を制御する化合物を同定に影響を及ぼしたことから、段階的な濃度設定を行なうことで、特定された遺伝子数をより選別するとともに、これらの候補化合物をスクリーニングしていくために、各化合物のデータベースと文献の検索を行ないながら優先度の高い化合物の特定を行なっている。

目前，在我们在一个超级年龄社会中的日本，牙科植入物治疗已广泛流行，但人们担心家里患者植入物感染引起的植入体炎正在增加。这项研究认为，调节在植入植物的软组织中特异性表达和改变的基因，这些基因是感染起源的（凹坑基因）是预防植入体性炎的关键，旨在通过应用同时评估许多化学作用的基因和基因的功能来开发预防植入炎药物周围的预防性炎性药物。在第一年，目的是“确定调节种植体周围组织特异性基因（凹坑基因）表达的化合物”。使用Epplant方法从4-8周龄SD大鼠（男性）的口腔粘膜结缔组织（雄性）建立原发性成纤维细胞培养物，并使用含有1,280种化合物的药物库进行高通量筛查方法（HTS方法）。在评估特定基因功能的抑制时，由细胞毒性和不适当浓度引起的细胞死亡的作用影响了控制凹坑基因表达的化合物的鉴定。通过在阶段设置浓度，可以进一步选择已识别基因的数量，并为筛选这些候选化合物，搜索每个化合物的数据库和文献以识别具有高优先级的化合物。