口腔粘膜上皮ポラリティの喪失と異型上皮フィールドの成立

口腔粘膜上皮极性丧失和非典型上皮区建立

• 批准号: 22K10203
• 负责人: 添野 雄一
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: The Nippon Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K10203/
• 关键词: 口腔癌; 扁平上皮癌; 早期悪性病変; 異型上皮; スフェロイド; オルガノイド; 癌微小環境; 上皮極性; 間質誘導

口腔粘膜上皮に発症する口腔癌は、早期に浸潤・転移を起こして生命を脅かす。健常な上皮組織には、異常細胞を排除する仕組みが備わっているが、実際には異常細胞が広がって癌の前駆状態となることが多い。我々は、この要因として「組織損傷と修復応答」に着目している。本研究では、上皮細胞の集合体（スフェロイド）やマウス舌粘膜の潰瘍・粘膜炎モデルを用いて、組織修復過程での異常細胞の進展機序解明を目指す。実験系では、変異（異型）上皮の認識・排除に働く分子機序について検証するとともに、口腔粘膜での異型上皮領域の成立に繋がる環境要因を明らかにすることを目的としている。初年度となる今回は、in vitro口腔上皮モデルの作出を目的として、不死化ケラチノサイトを用いた粘膜上皮スフェロイド・オルガノイドの作製を行った。スフェロイドに関しては、低接着性培養プレートを使用して48～72時間培養することで、小型で安定した形状の粘膜上皮スフェロイドを作製できた。また、不死化ケラチノサイトのハイドロゲル埋入培養では、増殖因子存在下で基底細胞様細胞が増殖し、増殖因子を取り除いて追加培養すると角化傾向を示すことが確かめられ、培養期間延長に伴って角化物形成が増加することを明らかにできた。また、マウス舌粘膜の潰瘍・粘膜炎モデルの予備検討では、麻酔下にてマウス舌の側縁部を歯科用クレンザーで擦過し、擦過回数と回収可能な細胞数の関連性を確かめた。今後は、異型上皮の認識・排除に働く分子機序を検証するin vitroモデルとして、不死化ケラチノサイトに変異誘発剤を感作させてランダム変異を誘導、クローニングして変異細胞ライブラリーの構築を目指す。これらの変異細胞の使用を前提として、粘膜上皮スフェロイドと線維芽細胞をハイドロゲル埋入して培養することにより、オルガノイド培養モデルを作出していく。

Oral mucosal epitheliosis, oral cancer, early infiltration and metastasis of oral mucosa. The normal epithelial tissue and the normal tissue are excluded from the normal tissue, the normal tissue and the normal tissue. We are going to pay attention because we have organized the organization to answer the question. In this study, epithelial cell aggregates (epithelial cell aggregates), tongue mucosa, mucositis, mucositis, and tissue repair were used to understand the progress of normal cells. The establishment of the environmental protection environment in the field of oral mucosal epithelium is due to the understanding that the establishment of the environmental protection environment is necessary for the establishment of the environment in the field of oral mucosal epithelium and oral mucosal epithelium. At the beginning of the year, the oral epithelium of in vitro was used for the purpose and non-death of the oral epithelium. In this case, the low adhesion test was used to culture the tissue in 48-72 hours, and the mucosal epithelium in the shape of a small tranquilizer was used to do the test. In the presence of culturing factors, the basal cell colonization, the addition of culturing factors, the addition of culturing factors and the formation of keratinization during the incubation period were confirmed by culture, culture and culture. The mucositis caused by mucositis in the mucous membrane of the tongue may be affected by the number of cells and the number of cells that may be detected. In the future, type I epithelial cells are excluded from the molecular order. The in vitro cells do not need to be killed. They are not dead. They are not dead. They are not dead. The premise, the mucous membrane, the epithelium, the germ, the cell, the cell.

项目成果

不死化内皮細胞を用いた脈管網オルガノイドゲルによる口腔癌浸潤モデルの検討

使用永生化内皮细胞的血管网络类器官凝胶检查口腔癌侵袭模型

• 发表时间: 2022
• 作者: 岡崎 章悟;吉川 桃子;相馬 智也;莇生田 整治;今井 健一;後飯塚 僚;佐谷 秀行;永野 修;工藤朝雄，埴 太宥，川本沙也華，佐藤かおり，田谷雄二，添野雄一;工藤朝雄，坪崎健斗，埴 太宥，川本沙也華，佐藤かおり，田谷雄二，添野雄一
• 通讯作者: 工藤朝雄，坪崎健斗，埴 太宥，川本沙也華，佐藤かおり，田谷雄二，添野雄一

口腔癌スフェロイドの表現型スクリーニングと３次元形態解析

口腔癌球体表型筛选及三维形态分析

• 发表时间: 2022
• 作者: Shan Qiusheng;Takabatake Kiyofumi;Kawai Hotaka;Oo May;Sukegawa Shintaro;Fujii Masae;Nakano Keisuke;Nagatsuka Hitoshi;Takahiro Kanno;栗林伸行，児島さやか，合田啓之，徳善紀彦，日野聡史，中城公一，内田大亮;工藤朝雄，埴 太宥，川本沙也華，佐藤かおり，田谷雄二，添野雄一
• 通讯作者: 工藤朝雄，埴 太宥，川本沙也華，佐藤かおり，田谷雄二，添野雄一

口腔癌の脈管内浸潤モデルとしての不死化細胞株を使用した脈管網オルガノイド培養の検討

使用永生化细胞系作为口腔癌血管内侵袭模型检查血管网络类器官培养物

• 发表时间: 2022
• 作者: 岡崎 章悟;吉川 桃子;相馬 智也;莇生田 整治;今井 健一;後飯塚 僚;佐谷 秀行;永野 修;工藤朝雄，埴 太宥，川本沙也華，佐藤かおり，田谷雄二，添野雄一;工藤朝雄，坪崎健斗，埴 太宥，川本沙也華，佐藤かおり，田谷雄二，添野雄一;工藤朝雄，添野雄一
• 通讯作者: 工藤朝雄，添野雄一