Hochdurchsatz-Analyse pathogener Eigenschaften Herpesvirus-8-kodierter Gene in Endothelzellen

内皮细胞中疱疹病毒 8 编码基因致病特性的高通量分析

• 批准号: 61129961
• 负责人: Professor Dr. Michael Stürzl
• 金额: --
• 依托单位: Abteilung Molekulare und Experimentelle Chirurgie (AMEC)
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Priority Programmes
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2007-12-31 至 2010-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/61129961?language=en
• 关键词: Hochdurchsatz; Analyse; pathogener; Eigenschaften; Herpesvirus

Das Kaposi-Sarkom (KS) ist eine angioproliferative Tumorerkrankung mit einer ausgeprägten entzündlichen Komponente. Die Entstehung des KS ist kausal mit einer Infektion durch humanes Herpesvirus-8 (HHV-8) verbunden. HHV-8 besitzt ein komplexes Genom mit mehr als 86 Genen. Bisher ist nicht bekannt, welche Gene von HHV-8 die KS-Pathogenese steuern. Die Aktivierung von NF-κB spielt eine zentrale Rolle bei entzündungsassoziierter Tumorigenese. Zudem ist der NF-κB-Signalweg für die Replikation von HHV-8 notwendig und in HHV-8-infizierten Zellen konstitutiv aktiviert. Um herauszufinden, welche Gene von HHV-8 NF-κB aktivieren können, wurden in der zurückliegenden Förderperiode systembiologische Untersuchungen zu Einzel- und Kombinationswirkungen von HHV-8-Genen auf den NF-κB-Signaltransduktionsweg durchgeführt. Hierbei wurden mit der Array-Transfektion orf75 und vFLIP als stärkste HHV-8-kodierte Aktivatoren des NF-κB-Wegs identifiziert. Interessanterweise wurde die Aktivität von vFLIP durch LNA-1 und vCYC deutlich verstärkt. Auch in KS-Tumoren konnte erstmals eine erhöhte NF-κB-Expression in HHV-8-infizierten Zellen nachgewiesen werden und dadurch die Bedeutung der Ergebnisse für die in vivo-Situation unterstützt werden. In vertiefenden Proteomanalysen wurde Mangan-Superoxiddismutase (MnSOD) als das am stärksten durch vFLIP in Endothelzellen aufregulierte Protein identifiziert. Da MnSOD der wichtigste zelluläre Schutzfaktor vor Superoxid-induziertem Zelltod ist, weisen diese Ergebnisse auf neue antiapoptotische Wirkungen von vFLIP hin. Aufbauend auf die erhaltenen Ergebnisse werden im kommenden Förderungsabschnitt folgende Ziele verfolgt: (1) Es sollen die erfolgreichen Untersuchungen zur Kombinationswirkung HHV-8-kodierter Gene auf die NF-κB-Aktivierung abgeschlossen werden. (2) Die Mechanismen der NF-κB-Aktivierung durch orf75 und Kombinationen von vFLIP mit LNA-1 und vCYC sollen eingegrenzt werden. (3) Die Mechanismen der vFLIP-induzierten MnSOD-Expression und deren Bedeutung für die antiapoptotische Wirkung von vFLIP in Endothelzellen sollen vertiefend analysiert werden. Der erfolgreiche Abschluss des Projekts wird mit der Array-Transfektion ein neues Verfahren für die Analyse kombinatorischer Genfunktionen von Viren mit komplexen Genomen bereitstellen und neue Einblicke in die Wirkungsweise viraler und zellulärer FLIPs in Endothelzellen eröffnen. Letzteres ist nicht nur von Bedeutung für virale Immunevasionsstrategien, sondern auch für molekulare Mechanismen der Apoptoseresistenz bei Tumoren.

Kaposi-Sarkom（KS）是一种血管增生性肿瘤，具有一种特殊的成分。KS的感染可能是由人类疱疹病毒8型（HHV-8）引起的。HHV-8是一个复杂的基因组，有梅尔86个基因。但这并不意味着HHV-8的基因会导致KS-病原体的死亡。NF-κB的活性在肿瘤发生中起着重要作用。因此，NF-κ B-信号通路可用于HHV-8的非特异性表达，并可用于HHV-8感染的Zellen研究。因此，HHV-8 NF-κB基因的激活，是在系统生物学研究的前沿，通过NF-κ B信号转导途径对HHV-8基因进行整合和联合。通过使用Array-Transfektion orf 75和vFLIP，可以识别NF-κB-Wegs的HHV-8-kodierte激活物。Interessanterweise wurde die Aktivität von vFLIP durch LNA-1 und vCYC deutlich verstärkt. KS-Tumoren也可以在HHV-8感染者中检测到NF-κ B的高表达，这是韦尔登感染后和感染后的体内环境下韦尔登的结果。在蛋白质组学分析中，锰超氧化物歧化酶（MnSOD）是通过vFLIP检测内皮细胞中的蛋白质。通过MnSOD对超氧化物诱导的Zelltod的保护作用，我们可以从vFLIP中获得新的抗氧化剂。结论：（1）HHV-8-kodierter基因与NF-κ B-Aktivierung的联合应用可导致NF-κ B-Aktivierung的死亡。(2)NF-κ B通过RNA-75和vFLIP与LNA-1和vCYC的联合激活的机制是一个韦尔登的问题。(3)VFLIP诱导MnSOD表达的机制和VFLIP在内皮细胞中的抗凋亡作用的研究韦尔登。Der erfolgreiche Abschluss des Projekts wird mit der Array-Transfektion ein neues Verfahren für die Analyse kombinatorischer Genfunktionen von Viren mit komplexen Genomen bereitstellen und neue Einblicke in die Wirkungsweise viraler und zellulärer FLIPs in Endothelzellen eröffnen. Letzteres ist努尔von Bedeutung für virale Immunevasionsstrategien，sondern auch für molekulare Mechanismen der Apoptoseristenz bei Tumoren.