神経－グリア相互作用におけるＪＮＫシグナルを介した高次脳機能制御メカニズムの解明

阐明神经元-胶质细胞相互作用中 JNK 信号介导的高级脑功能控制机制

• 批准号: 13J08039
• 负责人: 山崎 世和
• 金额: $ 2.53万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2013
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2013-04-01 至 2016-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13J08039/
• 关键词: MKK7; JNK; 神経細胞; グリア細胞; 精神疾患

精神疾患様の症状を呈する神経細胞特異的mkk7欠損マウスについて、解剖学的、行動学的な解析を行った。その結果、Parvalbumin陽性細胞が減少すること、強制水泳試験における不動時間が延長すること、プレパルス抑制試験においてプレパルス抑制の低下を呈すること、が観察され、さらなる精神疾患様の症状が明らかとなった。また、グリア特異的mkk7欠損マウスの解析と神経・グリア特異的mkk7欠損マウスの作出を行った。アストロサイトでCreERT2を発現するGLAST-CreERT2マウスとMkk7 floxマウスを交配して得られたマウスにタモキシフェンを投与し、アストロサイト特異的mkk7欠損マウスを作出した。現在このマウスにおいて神経変性疾患や精神疾患様の症状が観察されるか解析を進めている。また神経細胞とグリア細胞の両者でmkk7を同時に欠損させたマウスを作出するため、Mkk7 floxマウス、Syn-Creマウス、GLAST-CreERT2マウスの掛け合わせを行った。今後はこのマウスへタモキシフェンを投与しmkk7の欠損を誘導することを計画している。加えてAMPA型グルタミン酸受容体機能複合体におけるMKK7-JNKシグナルの機能解析を行った。アフリカツメガエル卵母細胞発現系にGluA1, GluA2, TARPg-8, CNIH2に加えMKK7, JNKを導入し、チャネル特性を解析した。しかしながら有意な変化は認められなかった。さらにMkk7欠損神経細胞の電気生理学的解析を行うため、CRISPR/Casの系の立ち上げを進めている。小脳顆粒細胞の初代培養にて、複数のguide配列を検討、効率良く遺伝子発現を抑制する配列をスクリーニングするin vitroの系の立ち上げに成功した。今後は、この系を用いてMkk7, JNKのguide配列のスクリーニングを行い、同定された配列をマウス脳に導入、急性スライス培養における解析を計画している。

The symptoms of mental disorders are presented by neurocyte-specific mkk7 impairments, anatomical, and behavioral analyses. Results: Parvalbumin positive cells decreased, immobility time prolonged during stress swimming test, depression of inhibition test decreased, symptoms of mental disorders were observed. The analysis of the loss of mkk 7 in different ways GLAST-CreERT 2 is now available. Mkk7 flox is available. The symptoms of mental disorders and psychiatric disorders are now being examined and analyzed. Mk7 flops, Syn-Cre, GLAST-Creert In the future, we will continue to invest in the future. Add AMPA-type receptor functional complex MKK7-JNK receptor functional analysis Analysis of the characteristics of oocyte development lines GluA1, GluA2, TARPg-8, CNIH2, MKK7, JNK and oocyte development. I'm going to try to change my mind. The analysis of electrical physiology of Mkk7-deficient neurons and the development of CRISPR/Cas system The primary culture of small granular cells, the study of multiple guide alignment, the improvement of the efficiency of gene expression inhibition, and the establishment of a new system in vitro were successfully carried out. In the future, Mkk7, JNK's guide arrangement, simultaneous arrangement, introduction, and acute culture analysis will be planned.

项目成果

Cornichons control ER export of AMPA receptors to regulate synaptic excitability.

• DOI: 10.1016/j.neuron.2013.07.028
• 发表时间: 2013-10-02
• 期刊: Neuron
• 影响因子: 16.2
• 作者: Brockie PJ;Jensen M;Mellem JE;Jensen E;Yamasaki T;Wang R;Maxfield D;Thacker C;Hoerndli F;Dunn PJ;Tomita S;Madsen DM;Maricq AV
• 通讯作者: Maricq AV

ストレス応答性キナーゼMKK7の高次脳機能における役割

应激反应激酶 MKK7 在高级脑功能中的作用

• 发表时间: 2013
• 作者: 山崎世和;他
• 通讯作者: 他