高度にADMA化されたRPS２の代謝回転システムの解析と病態生理的役割の解明

高度 ADMA 化的 RPS2 周转系统分析及其病理生理作用的阐明

• 批准号: 26460683
• 负责人: 木本 真順美
• 金额: $ 3.24万
• 依托单位: Okayama Prefectural University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2014
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2014-04-01 至 2016-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-26460683/
• 关键词: ADMA; タンパク質翻訳後修飾; アルギニンメチル化タンパク質; 40Sリボソームタンパク質サブユニット２; RPS2; NOS阻害剤; 動脈硬化; 翻訳後修飾; 糖尿病

本研究の目的は、タンパク質の翻訳後修飾の一つであるタンパク質アルギニンメチル化の病態生理的役割を解明するため、高度にアルギニンメチル（ADMA）化された40S ribosomal protein subunit 2 (RPS2) に焦点を当て、そのタンパク質代謝回転を解析することである。計画に従い実施した研究結果を以下に示した。（１）ADMA化されたRPS2が体内ADMA濃度の主な制御系としての可能性。ラット組織中の遊離型ADMAならびにタンパク結合型ADMAを当研究室で開発した競合阻害ELISA法により測定した。結合型ADMAの組織間における存在量とRPS2ならびにADMA化されたRPS2の発現量はよく合致していた。一方、組織中の遊離型ADMA濃度／結合型ADMA濃度(%)は、ADMAの分解酵素であるDDAH活性レベルと正の相関を示した。以上の結果は、RPS2のADMA化が組織中の結合型ADMA濃度を規定する主要因となることを示唆するとともに、体内の遊離型ADMAの濃度制御にはDDAHが重要な鍵を握っていることを示している。（２）ヒトPRMT3（RPS2を特異的にADMA化する酵素）に対するモノクローナル抗体の作製とエピトープ解析。得られた２種のモノクローナル抗体、C2B6 (IgG2a)およびG1H12 (IgG1)のうち、C2B6はELISAや免疫沈降に適し、そのエピトープはPRMT3のzinc finger ドメイン(50-99 a.a.)と重なる領域にあり、今後の研究遂行に良好なプローブとして働くことが期待される。（３）PRMT1、PRMT3を単独に、あるいはダブルノックダウンさせたHepG2におけるRPS2のADMA化率の変動が認められなかったことから、RPS2のADMA化には他のPRMTsの代償作用のあることが示唆された。

は の purpose, this study タ ン パ ク qualitative の modification after turn 訳 の a つ で あ る タ ン パ ク qualitative ア ル ギ ニ ン メ チ ル の pathological physiology of existing cut を interpret す る た め, highly に ア ル ギ ニ ン メ チ ル (ADMA) さ れ た 40 s ribosomal protein subunit 2 (RPS2 for right-side prompts on) に focus を when て, そ の タ ン パ ク metabolic returned to planning を parsing す る こ と で あ る. The plan に従 the implementation た the research results を the following に show た. (1) Adma-induced されたRPS2が the possibility of ADMA concentration in the body <s:1> the main な control system と <s:1> て て. ラ ッ ト の free type of ADMA な ら び に タ ン パ ク combination type of ADMA を when open laboratory で 発 し た co-opetition resistance against ELISA method に よ り determination し た. Combination type of ADMA の organizations に お け る と the presence of RPS2 for right-side prompts on な ら び に ADMA change さ れ た RPS2 for right-side prompts on の 発 now quantity は よ く close to し て い た. The ratio of <s:1> free ADMA concentration to bound ADMA concentration (%) in the tissue である and the activity of ADMA <s:1> decomposing enzyme であるDDAH レベ レベ と と are directly related to <s:1> を, indicating <s:1> た た. の above results は, RPS2 for right-side prompts on の ADMA の combination type ADMA concentration in the が organization を rules す る primarily for と な る こ と を in stopping す る と と も に, body の free type ADMA の concentration suppression に は DDAH が important な key を grip っ て い る こ と を shown し て い る. (2) ヒ ト PRMT3 (RPS2 for right-side prompts on を に ADMA of specific す る enzyme) に す seaborne る モ ノ ク ロ ー ナ ル antibody の cropping と エ ピ ト ー プ parsing. Have to ら れ た two の モ ノ ク ロ ー ナ ル antibodies, C2B6 (IgG2a) お よ び G1H12 (IgG1) の う ち, C2B6 は ELISA や immune sink に し, そ の エ ピ ト ー プ は PRMT3 の any zinc finger ド メ イ ン (50-99 A.a.) と heavy な る field に あ り, future research carries out に の な プ ロ ー ブ と し て 働 く こ と が expect さ れ る. (3) PRMT1, PRMT3 を 単 に alone, あ る い は ダ ブ ル ノ ッ ク ダ ウ ン さ せ た HepG2 に お け る RPS2 for right-side prompts on の ADMA flowrate の - move が recognize め ら れ な か っ た こ と か ら, RPS2 for right-side prompts on の ADMA change に は he の PRMTs の compensatory effect の あ る こ と が in stopping さ れ た.

项目成果

長期酢酸投与が骨格筋性状に及ぼす影響

长期服用醋酸对骨骼肌特性的影响

• 发表时间: 2014
• 作者: 荒岡千尋;吉村征浩;荒木彩;木本眞順美;山下広美
• 通讯作者: 山下広美

腎性貧血のバイオマーカーとしての赤血球ADMAの使用

使用红细胞 ADMA 作为肾性贫血的生物标志物

• 发表时间: 2014

Myristica fragrans成分による5-リポキシゲナーゼ阻害効果．

肉豆蔻成分对5-脂氧合酶的抑制作用。

• 发表时间: 2015
• 作者: 藤原葉子;佐藤春香;柴田彩霞;川和理恵;石川朋子;市 育代;川上祐生，森香子，岡本憲典，大河内脩史，金山友紀，金子由季，神崎圭太，山本登志子，木本眞順美，山下広美，伊東秀之，高橋吉孝．
• 通讯作者: 川上祐生，森香子，岡本憲典，大河内脩史，金山友紀，金子由季，神崎圭太，山本登志子，木本眞順美，山下広美，伊東秀之，高橋吉孝．

Inhibitory effect of nutmeg extracts on 5-lipoxygenase activity.

肉豆蔻提取物对 5-脂氧合酶活性的抑制作用。

• 发表时间: 2015
• 作者: Yuki Kawakami;Yoshiko Mori;Kensuke Okamoto;Shuji Okochi;Toshiko Suzuki-Yamamoto;Masumi Kimoto;Hiromi Yamashita;Hideyuki Ito;Yoshitaka Takahashi.
• 通讯作者: Yoshitaka Takahashi.

牛乳由来リポカリン型プロスタグランジンD合成酵素の精製と酵素学的性質．

乳源性脂质运载蛋白型前列腺素 D 合酶的纯化和酶学特性。

• 发表时间: 2015
• 作者: 池上寛子;高優子;柴田彩霞;川和理恵;石川朋子;市育代;藤原葉子;田中充樹，木本眞須美，川井恵理佳，瀬来由衣，戸田圭祐，目賀拓斗，川上祐生，高橋吉孝，山本圭，村上誠，山本登志子．
• 通讯作者: 田中充樹，木本眞須美，川井恵理佳，瀬来由衣，戸田圭祐，目賀拓斗，川上祐生，高橋吉孝，山本圭，村上誠，山本登志子．