特異的膵星細胞の機能的分取による膵癌Desmoplasiaの解明

通过特定胰腺星状细胞的功能分选阐明胰腺癌结缔组织形成

• 批准号: 26462065
• 负责人: 藤原 謙次
• 金额: $ 3.16万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2014
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2014-04-01 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-26462065/
• 关键词: 膵癌; 膵星細胞; 癌間質相互作用; DNAマイクロアレイ; NPAS1

膵癌は過剰な間質の増生を特徴とし癌の悪性化に影響していると考えられ、癌細胞と間質内の膵星細胞の相互作用の解明によって新たな治療アプローチへつなげることを目標としている。以前の検証でマトリゲルinvasion assayを応用した細胞の機能に基づく分離手技を用い、癌細胞に向けて移動した膵星細胞と移動しなかった細胞に分離、RNAを抽出、DNAマイクロアレイで解析し、2種の膵星細胞において、neuronal PAS domain protein 1（NPAS1）のmRNAが、膵癌細胞に向けて移動した膵星細胞において、移動しなかった細胞に比べ有意に高いことを認めていた。このNPAS１に関し、2014年度は定量的RT-PCR・共培養・RNA抑制実験を用いて検証した。定量的RT-PCRを用い、膵星細胞中のNPAS1のmRNAが膵癌細胞との共培養、および癌細胞からの上清添加によって持続的に増加していくことを確認し、また、EGFの添加実験によってもPSCs中のNPAS1　mRNAは増加していた。NPAS1のRNA抑制実験を行ったが、PSCsの移動能や浸潤能の変化を認めなかった。ここまでの内容を2014年7月の日本膵臓学会で発表を行った。EGFでの増加はしかしわずかであったことから、8種類ほどの代表的な伝達物質を用いて曝露の濃度と時間を変化させながら解析したが、再現性をもって確実に影響をきたす物質の同定には至らなかった。NPAS1の具体的な膵癌組織における役割に関しては不明のままであるが、本研究の代表者が2015年度アメリカのジョーンズ・ホプキンス大学へ留学することとなり研究の廃止申請を行うに至った。

胰腺癌的特征是基质的过度生长，并被认为会影响癌症的恶性转化，其目标是阐明基质中癌细胞与胰腺星状细胞之间的相互作用，从而导致一种新的治疗方法。 In previous verification, using a cell function-based separation technique using the Matrigel Invasion Assay, we separated into pancreatic stellate cells that migrated towards cancer cells and non-migrated cells, extracted the RNA, and analyzed using DNA microarray, and found that in two types of pancreatic stellate cells, the mRNA of neuronal PAS domain protein 1 (NPAS1) was significantly higher in pancreatic迁移到胰腺癌细胞的星状细胞比非迁移细胞中的细胞。该NPAS1在2014年使用定量RT-PCR，共培养和RNA抑制实验进行了验证。使用定量RT-PCR，我们证实，通过与胰腺癌细胞共培养以及通过癌细胞的上清液以及通过使用EGF，PSC中的NPAS1 mRNA进行实验，NPAS1的mRNA通过与胰腺癌细胞的共同培养不断增加。我们进行了一项实验以抑制NPAS1的RNA，但是没有观察到PSC的迁移率或侵入性能力的变化。到目前为止，这些内容是在2014年7月在日本胰腺科学学会上提出的。但是，EGF的增加很小，尽管大约有八个典型的发射器被用于分析结果，同时又有变化的暴露浓度和时间，但发现了可再现效应的NO物质。 NPAS1在胰腺癌组织中的具体作用尚不清楚，但是这项研究的代表于2015年在美国的琼斯霍普金斯大学出国留学，导致了废除这项研究的申请。