Modellgestützte Entwicklung der transienten Genexpression in Zellkulturen

点击翻译按钮获取中文摘要

Die transiente Transfektion von Säugerzellen als Alternative zur stabilen Expression findet für eine schnelle Proteinproduktion in der Pharmaindustrie zunehmend Beachtung. Allerdings wurde diese Technologie in Suspensionszellkulturen bis jetzt nicht ausreichend systematisch und quantitativ, insbesondere nicht an Hand von mathematischen Modellen, untersucht bzw. optimiert. Ziel des Forschungsvorhabens ist es, mittels molekularbiologischer Methoden und Ansätze zur mathematischen Modellierung das quantitative und kinetische Verständnis der DNA-Aufnahme, der DNA-Komplexfreisetzung aus dem Endosom, des nuklearen Imports und der Transkription und Translation bei Transfektionen mittels DNA-Polyethylenimine und DNA-Kalziumphosphat-Komplexen zu erweitern, um damit Strategien zur weiteren molekularbiologischen und zellphysiologischen Optimierung des Prozesses zu entwickeln. Ferner soll ein neuer Vektortyp in seiner Wirkungsweise in der transienten Genexpression optimiert werden. Es handelt sich hierbei um die in jüngster Zeit systematisch weiterentwickelten, nichtviralen replizierenden Episome, die eine Verlängerung der transienten Phase der Expression erlauben.