In Situ PCR 法によるPACAPレセプターサブタイプの機能形態学的解析

原位PCR法对PACAP受体亚型进行功能形态学分析

• 批准号: 08877005
• 负责人: 塩田 清二
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Showa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08877005/
• 关键词: PACAP; レセプター; 小脳; Insitu PCR

PACAP(Pituitary Adenylate Cyclase Activating polypeptide)はヒツジの視床下部から抽出されたアミノ酸残基38個のペプチドであり、免疫組織化学法および遺伝子組織化学法によりPACAP含有神経は視床下部のみならず広く脳内に分布していることを我々は明らかにした(Shioda and Nakai,1996)。PACAPに特異的なレセプター(TypeIPACAPレセプター)の_cDNAがクローニングされ、膜7回貫通型のGタンパクカップリング型であることが最近分かった。我々は、このTypeIPACAPレセプターに相補的なプローブおよびそのC-末端に対する特異的抗体を作成しラット脳内を詳細に検索した結果、レセプターを発現している神経細胞は前脳から脊髄に広く分布し、さらに精巣や卵巣にまで広く分布ていることを明らかにした(Shioda et.al.1996)。PCR法により、TypeIPACAPレセプターには5つのSplice variantがあり、そのレセプターサブタイプの組織内分布をin situ PCR法で検出することを目的に研究を行った。現在、in situ PCRの装置を用いて神経細胞の分布過程におけるレセプターサブタイプの発現を小脳でしらべているところであり、とくに小脳の顆粒細胞の分化過程に、ある特定のサブタイプ発現のある可能性のあることを観察している。さらに、サブタイプの遺伝子発現とシグナル伝達機構の連関をしらべ、細胞分化におけるサブタイプ発現の機能的意義を追求することを目的に、実験観察を行っていく予定である。

PACAP(Pituitary Adenylate Cyclase Activating Polypeptide) は ヒ ツ ジ の depending on the bed bottom か ら spare さ れ た ア ミ ノ acid residues 38 の ペ プ チ ド で あ り, immune histochemical methods お よ び posthumous son 伝 histochemical methods に よ り PACAP contain god 経 は depending on the lower part of the bed の み な ら ず hiroo く 脳 し に distribution in て い る こ と を I 々 は Ming ら か に し た (Shioda and Nakai,1996. PACAP に specific な レ セ プ タ ー (TypeIPACAP レ セ プ タ ー) の _cDNA が ク ロ ー ニ ン グ さ れ, membrane type 7 back through の G タ ン パ ク カ ッ プ リ ン グ type で あ る こ と が recently points か っ た. I 々 は, こ の TypeIPACAP レ セ プ タ ー に phase of な プ ロ ー ブ お よ び そ の C - end に す seaborne る specific antibody を made し ラ ッ ト 脳 を in detailed に 検 cable し た results, レ セ プ タ ー を 発 now し て い る before god 経 cells は 脳 か ら spinal marrow に hiroo く し, さ ら に fine 巣 や eggs 巣 に ま で hiroo く distribution て い る こ と を Ming Youdaoplaceholder0 に た た(Shioda et al.1996). PCR method に よ り, TypeIPACAP レ セ プ タ ー に は 5 つ の Splice variant が あ り, そ の レ セ プ タ ー サ ブ タ イ プ distribution を の tissues in situ PCR method で 検 out す る こ と を purpose に を line っ た. Now, in situ PCR の device を use い て god 経 cells の distribution に お け る レ セ プ タ ー サ ブ タ イ プ の 発 now を small 脳 で し ら べ て い る と こ ろ で あ り, と く に small 脳 に の の granule cell differentiation process, あ る specific の サ ブ タ イ プ 発 is の あ る possibility の あ る こ と を 観 examine し て い る. さ ら に, サ ブ タ イ プ の posthumous son 伝 発 now と シ グ ナ ル 伝 of institutions の even masato を し ら べ, cell differentiation に お け る サ ブ タ イ プ 発 の function meaning を now pursue す る こ と に を purpose, be 験 観 examine を line っ て い く designated で あ る.

项目成果

Shioda,S.: "Localization of PACAP and its type I receptor in the rat ovary : Immunohistochemistry and in situ hybridization." Ann NY Acad Sci. 805. 677-683 (1996)

Shioda,S.：“PACAP 及其 I 型受体在大鼠卵巢中的定位：免疫组织化学和原位杂交。”

Shioda, S.: "PACAP and its type I receptors in the rat hypothalamus : Neuroendocrine interaction." Ann NY Acad Sci. 805. 670-676 (1996)

Shioda, S.：“大鼠下丘脑中的 PACAP 及其 I 型受体：神经内分泌相互作用。”

Shioda,S.: "distribution of PACAP mRNA and PACAP receptor-like immunoreactivity in the rat brain." 解剖学雑誌. 71. 364- (1996)

Shioda, S.：“大鼠大脑中 PACAP mRNA 和 PACAP 受体样免疫反应性的分布。解剖学杂志”71. 364-（1996）。