B細胞におけるCD14発現の検討

B细胞中CD14表达的检查

• 批准号: 09877345
• 负责人: 浜田 茂幸
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09877345/
• 关键词: LPS; CD14; B細胞; RT-PCR; Northern blot; フローサイトメトリー

グラム陰性菌の外膜に存在するリポ多糖(lipopolysaccharide:LPS)はB細胞をはじめ種々の生体細胞に対して強い生物学的活性を有するが,生体細胞側のLPS受容体に関しては不明な点が数多く残されている.単球/マクロファージにおいては,細胞表面のCD14が,血清中のLPS結合蛋白(LBP)と結合したLPS,すなわちLPS-LBP複合体に対する受容体として働くことが明らかにされているが,リンパ系細胞,特にB細胞での発現については明らかではない.本研究では,マウスB細胞由来培養細胞株CH12.LX,種々のマウスmyelona細胞株および精製マウス脾臓B細胞を用いて,B細胞でのCD14発現について検討を行った.その結果,マウスマクロファージで報告されているCD14に特異的なプライマーを用いたRT-PCR法およびNorthernblot法の成績から,CH12.LXにおいてCD14mRNAの発現が認められた.さらに,このCD14mRNAのcDNAのシークエンスの結果は,マクロファージで報告されているCD14遺伝子のそれと完全に一致した.しかし陽性対照のマクロファージ由来株化細胞であるJ774.1と比較して,CH12.LXでのCD14mRNAの発現程度は低いことが明らかとなった.CH12.LXにおける細胞表面へのCD14分子の発現については,抗マウスCD14モノクローナル抗体を用いてフローサイトメトリーにより解析した結果,mRNAレベルでの成績に一致して,CH12.LXの細胞表面にCD14分子が発現していること,しかしその発現程度はJ774.1と比較して低いことが認められ,少なくとも特定のB細胞株においてはCD14分子が発現することが明らかとなった.しかし,今回調べたかぎりにおいては,マウスmylona細胞株および精製BALB/cマウス脾臓B細胞での細胞内のCD14mRNA発現および細胞表面上でのCD14分子の発現はともに認められなかった.

The presence of lipopolysaccharide (LPS) in the outer membrane of the negative bacteria is related to the biological activity of B cells and LPS receptors on the cell side. CD14 on cell surface, LPS binding protein (LBP) in serum, LPS binding protein (LPS), LPS binding protein (LBP) complex, LPS binding protein (LPS), LPS binding protein (LPS binding protein), LPS binding protein (LPS In this study, we investigated the development of CD14 in B cells derived from cultured cell line CH12.LX and cultured myelona cell line CH12.LX. CD14 mRNA expression was identified by RT-PCR and Northern blot. In addition, the results of the CD14 mRNA cDNA analysis were completely consistent with those reported in the previous report. The expression of CD14 mRNA in CH12.LX cells was lower than that in J774.1 cells. The expression of CD14 mRNA in CH12.LX cells was lower than that in J774.1 cells. The expression of CD14 mRNA in CH12.LX cells was higher than that in J774.1 cells. CH12. CD14 molecule is found on the surface of LX cells. The expression of CD14 mRNA in BALB/c cells and CD14 molecule on the surface of B cells was studied.