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口腔領域の組織機能保持細胞株の樹立-トランスジェニックマウスを用いて-

使用转基因小鼠建立保留口腔组织功能的细胞系

基本信息

批准号：
09877348
负责人：
畠山節子
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Iwate Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1999
项目状态：
已结题

项目摘要

(1)歯肉上皮は解剖学的にjunctional epithelium,sulcular epithelium,そしてoral gingival epitheliumと分類され、それぞれに発現するケラチン蛋白が異なっている。既に得られている歯肉組織に由来する上皮細胞のうち主としてGE1とGE6の2株について、抗ケラチンモノクローナル抗体(k4,k10,k13,k19)と顆粒層の表層細胞の細胞膜肥厚の構成分子であるインボルクリン、そしてケラトヒアリン顆粒の構成分子のひとつであるフィラグリンの局在を免疫組織学的染色で検討し細胞学的特性を解析した。GE1とGE6細胞はどちらも通常の単層培養を1週間以上継続するだけで、多層となり、微細形態学的に重層扁平上皮類似の構造を形成した。GE1とGE6細胞両株のsuprabasal cellがk4とk13(粘膜上皮に特徴的)が陽性で、k19(単層上皮の特徴的ケラチン)は陰性であった。今回用いたsubmerged cultureでは電顕的には角質層は形成されなかったが、免疫組織学的染色では高分子量ケラチンであるk10陽性細胞がまれに重層化した細胞層の表層にみられ、またインボルクリンやフィラグリンも同様の部位に検出された。こららの結果からGE1とGE6はsulcular epitheliumの特徴をもち、さらに重層化した部位の表層細胞は角化の所見を示しているので、潜在的にはoral gingival epitheliumの特徴ももっているとみなされた。(2)細胞は樹立された培養条件(10ng/ml EGF,1%fetal bovine serumを含むSFM101培地(ニッスイ)、33℃、5%CO_2)で継代培養されている。様々な刺激因子に対するサイトカインの発現を検討し、炎症時における上皮細胞の関与を解析した。細胞をLPS(E coli由来)、LTA(Streptococcus sangius由来)Abiotrophia adiacensとStreptococcus anginosusなどで4時間刺激した後にRNAを抽出し、RT-PCR法でIL-1α、IL-1β,TNF-αの発現を検討した。両GE細胞ともにLPS刺激によってIL-1βとTNF-α発現が誘導され、炎症時における上皮細胞の関与が示唆された。

(1) Junctional epithelium, sulcular epithelium, and oral gingival anatomy epitheliumとcategoryされ、それぞれに発appearsするケラチンproteinがisoなっている. The origin of the meat tissue and the origin of the epithelial cells are the GE1 and GE6 2 strains.いて, anti-ケラチンモノクローナル antibodies (k4, k10, k13, k19) and the surface fineness of the granular layer Molecules that constitute cell membrane hypertrophy, であるインボルクリン, and そしてケラトヒアリン particles. The のひとつであるフィラグリンのbureau is used to analyze the characteristics of immunohistological staining and cytology. GE1 and GE6 cells are usually cultured in a single layer for more than 1 week, resulting in the formation of multi-layered cells and a structure similar to double-layered squamous epithelium with fine morphology. GE1 and GE6 cell strains are supprabasal cells, k4 and k13 (mucosal epithelial special strain) are positive, and k19 (single layer epithelial special strain) are negative. This time I use いたsubmerged The formation of stratum corneum and the formation of cuticle by culture method and immunohistological staining are high molecular weight and high molecular weight k10 Positive cells are heavily stratified and the cell layer is surface layer.インボルクリンやフィラグリンも同様のpartsに検出された.こららのRESULTSからGE1とGE6はsulcular epitheliumの特徴をもち、さらに Heavy stratificationした parts of the surface cellsはkeratinizationの见をshowしているので、potentialにはoral gingival epitheliumの特徴ももっているとみなされた. (2) Cell culture conditions (10ng/ml EGF, 1% fetal bovine serum containing SFM101, 33°C, 5% CO_2) and subsequent culture conditions.様々な stimulating factor に対するサイトカインの発appears を検question し, inflammation におけるepithelial cell の switch and をanalysis した. Cell をLPS (E coli origin), LTA (Streptococcus sangius origin) Abiotrophia adiacens Streptococcus Anginosus 4-time stimulation is used to extract RNA, and RT-PCR method is used to detect IL-1α, IL-1β, and TNF-α.両GE cells are stimulated by LPS, IL-1β and TNF-α are present and induced, and inflammation is induced by epithelial cells.