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腫瘍拒絶抗原分子による口腔癌の免疫療法の確立

利用肿瘤排斥抗原分子建立口腔癌免疫疗法

基本信息

批准号：
09877386
负责人：
大越基弘
金额：
$ 1.28万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1999
项目状态：
已结题

项目摘要

本年度は、オリゴキャップ法による完全長cDNAライブラリー作成法の条件検討を進め、少量のサンプルからの、作成が可能になった。この改良法を用い、正常舌、及び舌癌について、オリゴキャップ法によるcDNAライブラリーの作製を行った。その結果、両者とも平均鎖長が約2000bpのライブラリーが得られた。独立に得られたクローンは約6x10^5である。それぞれのライブラリーから、各288クローンをランダムに分離し、5'端シークエンスを行ったところ、正常舌よりのcDNAライブラリーについて25クローンの、舌癌よりのcDNAライブラリーについて241クローンの5'端配列が得られた。これらの配列につき、既存のデータベースを用い相同性解析を行ったところ、既知の遺伝子と一致するクローンが正常で251クローン中170、舌癌で241クローン中149であった。また、これらの既知遺伝子のcDNAにつき完全長率を見たところ、正常が92.2%、舌癌で88.4%であった。さらに、それぞれのライブラリーでのクローンの出現頻度を既知のものについて、検討を加えた。それぞれのライブラリーから配列が得られた数が251と241であるので、統計学的に有意な結果ではないが、いくつかの興味有る知見が得られた。1)ケラチン遺伝子は4,6,13のそれぞれ型が両者に発現しているが、癌と正常を比べると6,13型は頻度が変わらないものの、4型は、癌で正常の5分の1に減っていた。このためケラチン遺伝子全体の発現も癌で低くなっている。2)正常で舌で発現の高いLIMタンパク質遺伝子が癌で発現がない。このような、舌癌と正常舌組織との遺伝子発現の差は、今後このライブラリーからのクローンの配列決定を進めることで、さらに多数見いだされてくるものと期待される。

This year, we have made progress in the study of the conditions for the preparation of complete cDNA fragments, and we have made progress in the preparation of small amounts of cDNA fragments. This improved method was used in the production of cDNA fragments for normal tongue and tongue cancer. As a result, the average lock length of both users and users is approximately 2000bp. The independence is about 6x10^5. All the 288 cDNA fragments are separated from each other, and the 5'-end cDNA fragments are aligned with each other. The cDNA fragments are aligned with the 25-end cDNA fragments. The cDNA fragments are aligned with the 241-end cDNA fragments. The analysis of identity of existing data sets and existing data sets is carried out. The analysis of identity of normal data sets is carried out. The analysis of identity of 251 The complete length rate of cDNA of known genes was 92.2% in normal and 88.4% in tongue cancer. In addition, the frequency of the occurrence of the event is known and discussed. 251, 241, 251, 25 1) Type 4, 6, 13 and type 4 are the most common types of cancer, and type 6, 13 are the most common types of cancer. All the children in the family are born with cancer. 2)Normal tongue development is high in LIM. The difference between the development of the gene in tongue cancer and normal tongue tissue is that the allocation of the gene in the future will be determined in most cases.