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摘出延髄-脊髄標本を用いたノックアウトマウスの自律神経中枢機能の研究

使用离体髓脊髓制剂研究基因敲除小鼠的自主神经中枢功能

基本信息

批准号：
08770029
负责人：
曹偉華
金额：
$ 0.64万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

エンドセリン-1遺伝子完全欠損マウスは出生直後に呼吸不全により死亡したため、生理学的実験は成獣に成長する不完全欠損体で行わざるを得ず、その結果、明快な結論を得るには困難があった。そこで、エンドセリン-1遺伝子完全欠損マウスの呼吸反射の異常が、中枢神経系に起因する可能性を、摘出延髄-脊髄標本を用いて検証し、エンドセリン-1が中枢性呼吸調節に果たす役割を明らかにする目的でこの実験を行った。エンドセリン-1遺伝子ノックアウトマウスを交配・維持し、不完全欠損体どうしの掛け合わせから完全欠損体の胎児を随時作成し、対照として遺伝背景が同一の野生型の胎児を用いた。出産予定日に帝王切開により得た完全欠損体の胎児または同一の野生型の胎児から延髄-脊髄標本を摘出し、呼吸出力の指標として第4頚髄前根(C4)の周期的活動電位を記録した。安定したC4群放電(呼吸活動に相当する)の記録が得られることを確認した後、標準潅流液をグルタミン酸を混入した潅流液、またはpH7.4から6.9に調整した潅流液(すなわち、酸性潅流液)と交換し、両群の中枢化学感受性を調べ、以下の結果を得た。1、ベースラインのC4群放電頻度は、エンドセリン-1遺伝子完全欠損体の方が野生型より有意に少なかった。2、グルタミン酸投与による呼吸活動増大は、両群で差がなかった。3、低pH刺激による反射性呼吸活動増大は、エンドセリン-1遺伝子完全欠損体で有意に低下していた。4、延髄の組織学的検索では、エンドセリン-1遺伝子完全欠損体に明らかな異常は見られなかった。以上の結果から、内因性のエンドセリン-1は中枢性呼吸調節に機能的な役割をはたしていると推定された。

The results of the study are as follows: 1. The complete deficiency of the fetus is caused by incomplete respiration after birth, death, physiological development, incomplete deficiency of the body, behavior, results, and conclusions. For the purpose of detecting, evaluating and evaluating the effects of central respiratory regulation, the authors suggest that there is a possibility that the central nervous system may be responsible for the abnormality of respiratory reflex. ENDED SELENE-1 gene can be used to mate, maintain, and connect fetuses with incomplete and incomplete defects at any time. Wild-type fetuses with the same genetic background can be used. The index of respiratory effort and the activity potential of the period before the root (C4) of the same wild-type fetus were recorded. After confirmation of the recording of stable C4 group fluids (respiratory activity equivalent), standard fluid was mixed with acid, adjusted to pH 7.4 and 6.9, and exchanged, and the central chemosensitivity of the group was modulated. The following results were obtained. 1. The frequency of C4 group Li is different from that of wild type. 2. Increase in respiratory activity and increase in respiratory activity. 3. Under low pH stimulation, the reflex respiratory activity increased, and the respiratory function decreased intentionally. 4. Histological examination of the extension of the tumor was carried out. The above results show that the intrinsic respiratory function is not expected to be affected.