B細胞ハイブリドーマを用いるアレルゲン特異的IgE抗体産生誘導システムの開発

使用 B 细胞杂交瘤开发过敏原特异性 IgE 抗体生产诱导系统

• 批准号: 08750929
• 负责人: 疋田 正喜
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08750929/
• 关键词: イムノグロブリンE; 抗原特異的応答; ハイブリドーマ; クラススイッチ; RAG

本研究においては、特異抗原による刺激を受けたB細胞におけるIgE産生へのクラススイッチ機構を解析することを目的として、B細胞ハイブリドーマTP67.21株を用いて種々の検討を行った結果以下のような成果が得られた。1.B細胞活性化因子である8-mercaptoguanosine をIL4と共に添加した場合において抗原レセプターからの刺激に依存してIgMからIgEへのクラススイッチが誘導できることが明らかとなった。In vitro において、抗原レセプターからの刺激に応答して細胞株レベルでIgEへのクラススイッチを誘導できるシステムは未だ報告されていないので、本研究の成果により確立された方法は、今後、抗原特異的なIgE産生調節機構を解析する上で非常に有用な手段となると考えられる。2.成果1で得られた結果をもとに培養系に極少数しか存在しないと考えられるIgE産生細胞を検出する方法について検討したところ、in situ の蛍光染色法により感度良くIgE産生細胞が検出できることが明らかとなった。この方法を用いることにより、培地中に分泌された抗体濃度が低く検出が困難な場合にも、抗体産生細胞の有無を調べることが出来、クラススイッチ検出方法として非常に有用な手段になると考えられる。3.さらに、TP67.21株においてIgEへのクラススイッチに伴い発現が誘導される種々の遺伝子について検索した結果に基づき、正常B細胞についても同様の検討を加えたところ、従来、成熟B細胞では発現していないと言われていた recombination activating gene 1,2が末梢の成熟B細胞では再発現しているということを発見した。このことは、従来からのB細胞分化機構の学説に大幅な変革をもたらす成果と考えられ、国内外から非常に高い評価得ている。

In this study, the target cells of this study were stimulated by specific antigens. The purpose of this study was to analyze the purpose of IgE, and to use several kinds of antigens to stimulate TP67.21. The results showed that the results of the following tests were satisfactory. 1. B) the cellular activation factor 8-mercaptoguanosine IL4 was added in total. The combination of antigens, antigens, stimuli, IgM, IgE, stimuli, stimuli, The results of this study have confirmed that the methods used in this study have been established. In the future, the antigen-specific IgE health laboratory will be very useful in the analysis of cell lines. The results of this study have confirmed that the method is very useful in the future. two。 Results 1. The results showed that a very small number of IgE cells were detected in a very small number of samples. The methods of light staining and in situ staining were used to detect the sensitivity of IgE cells. The method is very useful in the production of antibodies, the production of antibodies in the culture, the production of antibodies, the secretion of antibodies, the secretion of antibodies in culture, the secretion of antibodies, the production of antibodies, antibodies 3. This is not true, and the TP67.21 strain does not change the quality of the data. In addition, the results show that the results are similar to each other, and the results are similar to those of the same group of users. The results show that the results are similar to each other, and the results show that the results are similar to each other. Mature B cells show that they don't know what to say. Recombination activating gene 1, 2, mature B cells, mature cells. In recent years, there has been a great deal of change in the organization of cell differentiation, and there has been a great deal of success in the examination of the results of the reform, both at home and abroad.

项目成果

疋田正喜: "Reexpression of RAG-1 and RAG-2 genes in activated mature mouse B cells" Science. 274. 2092-2094 (1996)

Masaki Hikita：“RAG-1 和 RAG-2 基因在激活的成熟小鼠 B 细胞中的重新表达”《科学》274. 2092-2094 (1996)。

疋田正喜: "Requirements of a costimulus for IL-4-induced IgE class switching in murine B cells activated via antigen-receptors." Journal of Immunology. 156. 2730-2736 (1996)

Masaki Hikita：“通过抗原受体激活小鼠 B 细胞中 IL-4 诱导的 IgE 类别转换的共刺激的要求。” 156. 2730-2736 (1996)