Analysis for effects of IgG+ B cell selection machinery on the onset of autoimmue diseases.

本研究においては、SLE病態形成にParm1の関与の有無を検討することにより、Parm1がSLEに対する創薬ターゲットとなり得るのか否かについて検討することを目的としている。その初期検討として、IgG2a陽性であり、Parm1を恒常的に発現しているA20細胞のParm1遺伝子を欠失させ、Parm1がIgG型BCR依存性のアポトーシスに関与しているのか否かを明らかにすることを試みた。その結果、少なくともBimについては、Parm1欠損A20細胞において、BCRの強架橋によって野生型と比較して発現量がより強く上昇することが明らかとなった。このことは、Parm1がIgG型のBCR依存性のB細胞の選択に関わっていることを強く示唆している。一般的に自己免疫疾患においては、自己反応性のB細胞におけるアポトーシス異常が引き起こされた結果、自己抗体が産生されると考えられていることから、Parm1は事前の期待どおりB細胞の選択異常に関与している可能性が示された。現在、SLEモデルマウスにおけるParm1の発現を詳細に検討しており、来年度以降に、SLEモデルマウスにおけるParm1の役割を明らかにする予定である。また、独自に樹立済みの抗Parm1モノクローナル抗体産生ハイブリドーマについては、無血清培地への馴化が終了したことから、高密度培養を実施中でありin vivo投与が可能となるだけのモノクローナル抗体を大量に得つつある。さらに、ミニスケールでは、当該抗体を精製できるプロトコールを樹立することに成功していることから、今後、大量に抗体を含む培養上清が得られ次第、大スケールでの精製を行う予定である。

本研究においては、SLE病態形成にParm1の関与の有無を検討することにより、Parm1がSLEに対する創薬ターゲットとなり得るのか否かについて検討することを目的としている。その初期検討として、IgG2a陽性であり、Parm1を恒常的に発現しているA20細胞のParm1遺伝子を欠失させ、Parm1がIgG型BCR依存性のアポトーシスに関与しているのか否かを明らかにすることを試みた。その結果、少なくともBimについては、Parm1欠損A20細胞において、BCRの強架橋によって野生型と比較して発現量がより強く上昇することが明らかとなった。このことは、Parm1がIgG型のBCR依存性のB細胞の選択に関わっていることを強く示唆している。一般的に自己免疫疾患においては、自己反応性のB細胞におけるアポトーシス異常が引き起こされた結果、自己抗体が産生されると考えられていることから、Parm1は事前の期待どおりB細胞の選択異常に関与している可能性が示された。現在、SLEモデルマウスにおけるParm1の発現を詳細に検討しており、来年度以降に、SLEモデルマウスにおけるParm1の役割を明らかにする予定である。また、独自に樹立済みの抗Parm1モノクローナル抗体産生ハイブリドーマについては、無血清培地への馴化が終了したことから、高密度培養を実施中でありin vivo投与が可能となるだけのモノクローナル抗体を大量に得つつある。さらに、ミニスケールでは、当該抗体を精製できるプロトコールを樹立することに成功していることから、今後、大量に抗体を含む培養上清が得られ次第、大スケールでの精製を行う予定である。