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血管作動物質に対する腎微小血管応答のin vivo計測

肾微血管对血管活性物质反应的体内测量

基本信息

批准号：
08750934
负责人：
望月精一
金额：
$ 0.64万
依托单位：
Kawasaki College of Allied Health Professions
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

NO濃度計測:まず、周囲の環境からの電気的ノイズの計測への影響を排除するため電磁気的に遮蔽したケージを作製しノイズの影響を調べたところ、1pAレベルの変化まで確認できるまでに改善できた。さらに微細NO電極の感度特性と再現性をNOドナーであるS-nitroso-N-acetylpenicillamine(SNAP)の溶液で調べたところ、SNAP濃度70〜570μMの範囲で計測値との間に1次の高い相関(r^2=0.99)が得られた(1pA≒1nMNO)。摘出イヌ大腿動脈壁中膜にNO電極を刺入し、潅流条件下で計測したところ、潅流速度増加に比例してNO濃度も増加し、潅流速度(<60ml/min)すなわち血管壁上のずり応力依存性の内皮細胞(内皮細胞型NO合成酵素)からのNO生成を認めた。また、NO生成の基質であるL-arginine(L-arg)を潅流したところ、L-argの潅流前に比較して生成NO量は有意に増大し、NO合成酵素阻害剤のN^G-monomethyl-L-arginineあるいはN^G-nitro-L-arginineの潅流により減少したことからNO生成の抑制が確認でき、この微細NO電極がNOを選択的に検出していることを認めた。マイクロダイアリシス法:血液透析用中空糸(再生セルロース、分画分子量:50,000)をイヌ腎臓に刺入し、プロスタグラディンE_2(PCTE_2)を回収・濃度測定を行ったNO合成酵素の阻害薬であるN^G-nitro-L-arginine-methylesterの投与によりNO生成を抑制するとそれに対応してPGE_2の生成量が増加していた。さらにその変化量を腎皮質と髄質で比較すると髄質の方が大きく、NO生成抑制による血流の減少による組織のダメ-ジの軽減のため補完的にPGE_2が分泌されたものと推測された。

NO concentration measurement: elimination of the influence of electromagnetic shielding on the measurement of NO concentration The sensitivity characteristics and reproducibility of the fine NO electrode were measured in a solution of S-nitroso-N-acetylpenicillin (SNAP). The first order high correlation (r^2=0.99) was obtained between the measured values and the SNAP concentration of 70 ~ 570μM (1pA ~ 1nMNO). The NO electrode was inserted into the middle membrane of the femoral artery wall, and the NO concentration increased in proportion to the increase of the flow velocity (<60ml/min) under the condition of flow velocity. The NO production of the endothelial cells (endothelial cell-type NO synthase) in the vascular wall was recognized. NO production substrate L-arginine(L-arg) flow rate, L-arg flow rate, NO synthesis enzyme inhibitor N^G-monomethyl-L-arginine flow rate, NO synthesis enzyme inhibitor N ^G-nitro-L-arginine flow rate, NO synthesis enzyme inhibitor N A new method for determining the concentration of NO synthase in hemodialysis was developed. The NO synthase inhibitor N-nitro-L-arginine-methylester was administered to the hemodialysis system and NO production was inhibited. The amount of PGE2 produced was increased. The amount of PGE_2 secreted by the kidney cortex was estimated to be higher than that of the control group, and the NO production was inhibited.