微小血管の機能調節機構評価のための血流速度光計測と血管壁由来因子の電気化学計測

光学血流速度测量和电化学测量血管壁衍生因子评估微血管的功能调节机制

• 批准号: 06750833
• 负责人: 望月 精一
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Kawasaki College of Allied Health Professions
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06750833/
• 关键词: 血管内皮由来弛緩因子; 一酸化窒素; 微細NO電極; 摘出血管

血管内皮由来弛緩因子(EDRF)である一酸化窒素(NO)は、半減期がごく短く反応性に富んでいるためにinvivoでNOの動態を直接リアルタイムで評価することはこれまで困難であった。そこで本研究では、(i)近年開発された微細NO電極による測定の安定化と (ii)NOの主たる血管内作用部位である血管中膜における測定の可能性について検討した。すなわち、NO産生の主要な修飾因子である潅流液流速(ずり応力)を変えて、動脈壁内NO生成量を計測した。方法として微細NO電極(直径:100、200μm)を用い、電気的ノイズを遮蔽するために測定装置・潅流装置全てを遮蔽用シールド内に設置した。電極のキャリブレーションは、NO生成標準物質のS-nitroso-N-acetyl-dl-penicilamine(SNAP)溶液にて行った。イヌの摘出大腿動脈壁に血管の外膜から中膜まで顕微鏡観察下でマイクロマニピュレータを用いて刺入し、Krebs-Henseleit緩衝溶液(50μML-arginineを含む)を潅流した状態でNO濃度を測定した。ずり応力の影響は潅流速度を任意に変化させて計測を繰り返すことにより検討した(<30ml/min)。実験結果としてSNAPから生成するNOの測定の再現性から電極の適用性を確認した。検討した潅流速度範囲全体で潅流速度の増加に比例してNO生成量(測定電流の定常値)が増大し(max:約50pA;r^2=0.77,p<0.05)、NO生成量が、ずり速度に依存することを認めた。今後は、NO生成の刺激因子としてずり応力以外にアセチルコリンなどの血管拡張薬剤、NO合成酵素の阻害剤などの投与によるNO生成の定量的測定を行う予定である。

Vascular endothelial origin relaxing factor (EDRF) で あ る a acidification smothering は (NO), half life が ご く short く anti 応 sex に rich ん で い る た め に invivo で NO の dynamic を directly リ ア ル タ イ ム で review 価 す る こ と は こ れ ま で difficult で あ っ た. そ こ で this study で は, (I) in recent years, open 発 さ れ た fine NO electrode に よ る determination の stabilization と (ii) NO の main た る intravascular working part で あ る blood vessels in the membrane に お け る determination の possibility に つ い て beg し 検 た. す な わ ち, NO の main な modifier で あ る 潅 liquid flow velocity (ず り 応) を - え て, artery walls inside the NO generation を measuring し た. Methods と し て fine NO electrode (diameter: 100, 200 microns) を い, electric 気 ノ イ ズ を covered す る た め に determination device 潅 flow device, full て を covered with シ ー ル ド し に set inside た. Electrode の キ ャ リ ブ レ ー シ ョ ン は, NO standard material の S - nitroso - N - acetyl - dl - penicilamine (SNAP) solution に て line っ た. イ ヌ の pick the thigh artery wall に の outer membrane か ら in membrane ま で 顕 観 examine the micro mirror で マ イ ク ロ マ ニ ピ ュ レ ー タ を with い て Pierce し, Krebs - Henseleit buffer solution (50 mu ML - arginine を む) を 潅 flow し た state で NO concentration determination を し た. ず り 応 influence の は 潅 を arbitrary に flow speed variations change さ せ て measuring を Qiao り return す こ と に よ り beg し 検 た (< 30 ml/min). Experimental results と て てSNAP する ら generate するNO <s:1> determination <s:1> reproducibility <e:1> ら electrode <s:1> applicability を confirmation た た Beg し 検 た 潅 flow speed fan 囲 all で 潅 flow speed の raised に proportion し て NO generation (determination of current の unsteady numerical) が raised large し (Max: about 50 pa r ^ 2 = 0.77, p < 0.05), NO generation が, ず に り speed dependent す る こ と を recognize め た. Future は, NO generation の stimulating factor と し て ず り 応 outside force に ア セ チ ル コ リ ン な ど の vessel company, zhang 薬 tonic, NO synthetic enzyme の resistance against tonic な ど の cast with に よ る NO generated の quantitative determination of line を う designated で あ る.

项目成果

望月精一 他: "微細NOセンサーの臓器内NO計測への適用性の検討" 医科器械学. (印刷中). (1995)

Seiichi Mochizuki 等人：“微小 NO 传感器在器官中 NO 测量中的适用性研究”医疗仪器（1995 年出版）。

Seiichi Mochizuki,etal.: "Effect of intra-myocardial siosh phenomenon on the endothelial cell from of the coromary artry." Proceedings of the World Comgress on Medical Physics and Biomedical Engineering. 1. 201- (1994)

Seiichi Mochizuki 等人：“心肌内 siosh 现象对冠状动脉内皮细胞的影响”。

望月,精一: "循環器システムに見る生体機能とその応用の可能性" 化学工学. 58. 549-551 (1994)

Mochizuki, Seiichi：“循环系统中的生物功能及其应用可能性”化学工程 58. 549-551 (1994)。

望月精一 他: "微細NOセンサーによる摘出イヌ大腿動脈壁中のNOの測定" Japanese Circulation Journal. 59 Supplement 1. 389- (1995)

Seiichi Mochizuki 等人：“使用微小 NO 传感器测量离体犬股动脉壁中的 NO”，日本循环杂志 59 增刊 1. 389- (1995)。

望月精一 他: "一酸化窒素ラジカル計測用電極の生体計測への適用性の検討を応用" BME. (印刷中). (1995)

Seiichi Mochizuki 等人：“将电极测量一氧化氮自由基的适用性研究应用于生物测量”（出版中）。