ALS病態に対するFGFR1を標的とした新規治療戦略確立のための基盤研究

建立针对 FGFR1 的 ALS 病理新治疗策略的基础研究

基本信息

批准号：
22KJ2579
负责人：
伊藤泰生
金额：
$ 1.09万
依托单位：
Gifu Pharmaceutical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2023
资助国家：
日本
起止时间：
2023-03-08 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22KJ2579/
关键词：
ALS FGFR1 SOD1 C9orf72

项目摘要

本研究では、筋萎縮性側索硬化症（ALS）病態における線維芽細胞成長因子受容体1（FGFR1）の細胞種（運動神経、ミクログリア、アストロサイト）ごとの機能を明確にし、神経保護効果のみを誘導する方法を確立する。最終的には、その成果を利用したFGFR1によるALSの新たな治療戦略の基盤を提供することを目的とする。まず、ALSにおけるFGFR1の発現を調べるために、マウス運動神経様細胞NSC34にALSの原因遺伝子として知られるSOD1、TDP43の変異体およびC9orf72由来ALS患者で凝集するジペプチドリピートタンパク質(DPR)を導入し、qRT-PCRを行った。結果、変異SOD1、DPRを導入した細胞では、FGFR1の発現量に変化はなく、変異TDP43導入細胞では、FGFR1のmRNA発現量の減少が確認できた。次に、FGFRのリガンドであるFGF2による神経保護効果に関して検討した。FGF2の処置は、変異SOD1及びDPR導入NSC34細胞における細胞生存率の低下を回復させることを確認した。また、FGF2処置によるNSC34の突起伸長の検討を行い、FGF2処置による突起の伸長を確認した。さらに、ミクログリアにおけるFGFR1の役割を調べるために、マウスミクログリア細胞株BV2を用いた。FGFR1の活性化は、グルタミン酸受容体であるGlastの発現を増加させることが知られている。また、FGFR1の活性化が、ミクログリアによる炎症の誘発を抑制することも知られている。qRT-PCRにより、FGF2処置をしたBV2細胞のGlastおよび炎症性サイトカインのmRNA発現量を調べたところ、GlastのmRNA量の増加とIL-1βやiNOSなどの減少が確認できた。今後、FGFR1選択的なリガンドを用いた検討および共培養系を用いて、FGFR1活性化による複合的な影響について明らかにする。

这项研究将通过细胞类型（运动神经，小胶质细胞，星形胶质细胞）阐明成纤维细胞生长因子受体1（FGFR1）在肌萎缩性侧向硬化症（ALS）病理学中的功能，并建立了一种仅诱导神经保护作用的方法。最终，目的是使用结果为使用FGFR1的ALS提供新的治疗策略的基础。首先，为了研究ALS中FGFR1的表达，将小鼠运动神经元样细胞NSC34引入了小鼠运动神经元样细胞中，该细胞具有SOD1，TDP43的突变体，称为ALS的基因和二肽重复蛋白（DPR），这些蛋白（DPR）在C9ORF72和QRT-PRC中均表现出ALS患者的聚集。结果，在使用突变体SOD1和DPR引入的细胞中，FGFR1的表达水平没有变化，并且降低了使用突变体TDP43引入的细胞中FGFR1的表达水平。接下来，我们研究了FGF2的神经保护作用，FGF2是FGFR的配体。用FGF2处理可以恢复突变SOD1和DPR转导的NSC34细胞中细胞活力的降低。此外，检查了NSC34通过FGF2处理的突出，并通过FGF2处理确认了NSC34的突出。此外，为了研究FGFR1在小胶质细胞中的作用，使用了小鼠小胶质细胞系BV2。已知FGFR1的激活会增加谷氨酸受体Glast的表达。还知道，FGFR1的激活抑制了小胶质细胞诱导炎症。当QRT-PCR检查了经FGF2处理的BV2细胞中GLAST和炎症细胞因子的mRNA表达水平时，已经证实了胶状mRNA的量和IL-1β和INOS的降低。将来，我们将使用共培养系统调查并阐明FGFR1激活的综合作用，并阐明FGFR1激活的结果。