間葉系間質細胞の臓器特異性を決定する転写因子の解析

决定间充质基质细胞器官特异性的转录因子分析

• 批准号: 22KJ2353
• 负责人: 黒澤 珠希
• 金额: $ 2.83万
• 依托单位: The University of Tokyo (2023)The University of Tokushima (2022)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2023
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2023-03-08 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22KJ2353/
• 关键词: 間葉系間質細胞; 転写因子; 骨格筋

【骨格筋特異的な転写因子X陽性細胞の様々な臓器における発現解析】　マウスの骨格筋、心臓、皮下脂肪、肝臓、肺、および小腸の6臓器を対象に、転写因子X陽性細胞の分布を確認した。具体的には各臓器の凍結サンプルに対する転写因子Xと各種細胞マーカーの蛍光免疫染色を行い、共焦点レーザー顕微鏡を用いて転写因子X陽性細胞の局在を観察した。【発生過程における骨格筋特異的な転写因子X陽性細胞の同定と機能解析】　筋における転写因子Xの機能解析を目的として、CRISPR-Cas9 systemを用いた転写因子X遺伝子組み替えマウス(転写因子X floxマウス) の作出を実施した。筋形成期における転写因子X陽性細胞の同定を目的として、特に間葉系間質細胞に関しては、PDGFRα陽性細胞（以下Pα細胞）の核がGFP標識されたマウス (Pdgfra-H2BeGFPマウス) のマウス胎児の前肢を行った。具体的には、筋形成時期であるE11.5, E12.5のマウス胎児の薄切標本を作製、あるいは、透明化した胎児サンプルに対する蛍光免疫染色を行い、共焦点レーザー顕微鏡を用いて観察した。【間葉系間質細胞の臓器特異性を決定する転写因子の解析】　将来的に、筋間質の臓器特異性に関する解析結果を他臓器へも応用する目的で、マウス6臓器（骨格筋、心臓、皮下脂肪、肝臓、肺、小腸）のPα細胞に対するRNAseq解析結果に関して、再度多臓器間比較を実施した。結果、筋Pα細胞にて特異的に高発現する転写因子X以外にも、小腸筋層や小腸粘膜層といったPα細胞に固有な遺伝子群を見出した。

The skeletal muscle specific な planning write factor X positive cells の others 々 な viscera に お け る 発 parsing 】 now マ ウ ス の skeletal muscle is crucial, the heart is crucial, subcutaneous fat, liver, lung, お よ び small intestine の 6 viscera を like に seaborne, planning to write factor X positive cells の distribution を confirm し た. Specific に は each viscera の freeze サ ン プ ル に す seaborne る planning write factor X と various cell マ ー カ ー の 蛍 immune dyeing line を い, total focus light レ ー ザ ー 顕 micromirror を with い て の bureau planning write factor X positive cells in を 観 examine し た. 【 発 birth process に お け る skeletal muscle specific な planning write の factor X positive cells with fixed と function parsing 】 reinforcement に お け る planning write factor X の function analytical を purpose と し て, CRISPR - Cas9 system を い た planning write factor X heritage 伝 subgroups み for え マ ウ ス (planning write factor X flox マ ウ ス) の make を be applied し た. Muscle formation に お け る planning write の factor X positive cells with fixed を purpose と し て, leaf of mesenchymal cells between に に masato し て は, PDGFR alpha positive cells (P) alpha cells の nuclear が GFP logo さ れ た マ ウ ス (Pdgfra - H2BeGFP マ ウ ス) の マ ウ ス tire where の forelimbs を line っ た. Formation of the specific に は, muscle で あ る E11.5, E12.5 の マ ウ ス tire where の cut thin specimen を system, あ る い は, transparent し た tire where サ ン プ ル に す seaborne る 蛍 immune dyeing line を い, total focus light レ ー ザ ー 顕 micromirror を with い て 観 examine し た. 【 between leaf of mesenchymal cells の viscera specificity を decided す る planning write factor analytical 】 の future に, interstitial の viscera specificity に masato す る analytical results を his viscera へ も 応 with す る purpose で, マ ウ ス 6 viscera (skeletal muscle is crucial, the heart is crucial, subcutaneous fat, liver, lung, small intestine) の P alpha cells に す seaborne る RNAseq analytical results に masato し て, again much viscera The comparison between を and た. Results, P alpha cells に て high specific に 発 now す る planning write outside factor X に も, small intestine muscle layer や intestinal mucosa と い っ た P alpha cells に inherent な heritage 伝 subgroup を shows し た.

项目成果

小腸、大腸PDGFRα+細胞の生理機能解明

阐明小肠和大肠 PDGFRα+ 细胞的生理功能

• 发表时间: 2022
• 作者: 茶圓貴志;黒澤珠希;岸和寿;梶典幸;堀正敏
• 通讯作者: 堀正敏

PDGFRα陽性間質細胞の筋特異性からサルコペニアのメカニズムに迫る

从PDGFRα阳性基质细胞的肌肉特异性探讨肌肉减少症的机制

• 发表时间: 2022
• 作者: 黒澤 珠希;梶 典幸;上住 円;吉本 由紀;湊 圭太郎;長谷 栄治;堀 正敏;上住 聡芳
• 通讯作者: 上住 聡芳