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麻酔薬を用いた上皮細胞膜構造の形成機構の解析

利用麻醉剂分析上皮细胞膜结构的形成机制

基本信息

批准号：
22KJ2374
负责人：
松本惇志
金额：
$ 3.08万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2023
资助国家：
日本
起止时间：
2023-03-08 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

昨年度までの研究から、アルコールは上皮細胞において脂質局在や膜物性の変化を引き起こす可能性が示唆された。しかし、生細胞の膜物性の観察手法は限られている。そこで本年度は、生体膜、特に形質膜の流動性の変化を捉える手法の確立を試みた。細胞における膜物性を可視化する技術のひとつとして、環境によって蛍光波長の変わるソルバトクロミック色素を用いた観察が挙げられる。これらの色素は、流動性の低い膜では短波長、流動性の高い膜では長波長の蛍光を発するため、共焦点蛍光顕微鏡で異なる波長のシグナルを同時取得し、比として表すことで膜の流動性を可視化できる。近年報告された、高輝度のソルバトクロミック色素であるPKを用いた、培養上皮細胞の観察系を確立した。実際にPKを用いて観察を行ったところ、細胞内膜のシグナルが強く、相対的に形質膜のシグナルが弱いため、細胞接着構造の存在する形質膜の流動性変化を観察するのは困難であることがわかった。そこでPKの物性に着目し、新たに化学修飾を施すことで、形質膜に保持させる改変を行った。人工脂質膜を用いた観察から、改変型PKでも膜流動性に依存して波長が変化することがわかった。そこで実際に培養細胞を用いて観察を行ったところ、細胞内膜の強いシグナルがなくなり、形質膜特異的なシグナルが得られる新規プローブが複数得られた。また、改変型PKと蛍光タンパク質との同時観察系を確立しており、タンパク質の局在と関連した膜流動性変化の観察を試みている。

The research conducted last year showed the possibility of lipid metabolism in epithelial cells. The method of observing the membrane properties of living cells is limited. This year, the fluidity of biological membrane and special membrane was determined by means of experiment. The technology of visualization of membrane properties in cells and environment is very important for the detection of pigment in cells. The pigment has a low fluidity and the membrane has a short wavelength and a high fluidity. The membrane has a long wavelength and a confocal microscope. The wavelength and the fluidity of the membrane can be visualized simultaneously. In recent years, it has been reported that the detection system of cultured epithelial cells has been established in the use of PK and high brightness pigment. In practice, it is difficult to detect changes in the fluidity of plasma membrane due to the existence of PK, membrane structure and membrane structure. The physical properties of the PK are modified by chemical modification and the membrane is maintained. Artificial lipid membranes are used to detect and modify membrane fluidity depending on wavelength. In this case, the cell culture medium is used to detect the cell membrane, the cell membrane is used to detect the cell membrane, and the cell membrane is used to detect the cell membrane. The study of membrane fluidity was carried out in order to establish the relationship between the quality and the fluidity of the membrane.